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[doc] 半叶马尾藻多糖的提取和分析 半叶马尾藻多糖的提取和分析 第24卷,第12期 2004年12月 光谱学与光谱分析V01.24,N..12,pp1560—1562 SpectroscopyandSpectralAnalysisDecember,2004 半叶马尾藻多糖的提取和分析 孟庆勇,刘志辉,徐美奕,东野广智 广东医学院分析中心,广东湛江524023 摘要采用热水浸提法提取半叶马尾藻多糖 [Sargassumhemiphyllum(Turner)C.Ag.polysaccharides. SHP],并对其理化性质,提取率,含量,组成和性质进行了研究.SHP呈灰白色粉末状,溶于水,不溶于有 机溶剂.碘一碘化钾反应呈阴性,说明提取物为非淀粉性多糖.提取率为7.04%,总糖含量为82.9%.紫外 扫描结果表明多糖几乎不含核酸和蛋白质.红外光谱显示SHP主要为吡喃多糖,并显示多糖分子结构中存 在卢一糖苷键.薄层层析结果提示该多糖可能为木聚糖.上述结果不仅说明该方法提取的物质是多糖,而且纯 度好,提取效率高. 主题词半叶马尾藻多糖;提取;紫外扫描;红外光谱;薄层层析 中图分类号:Q539文献标识码:A文章编号:1000—0593(2004)12—1560—03 多糖是由同种单糖或不同种单糖通过糖苷键结合而成的 大分子碳水化合物,也含有少量的蛋白质,氨基酸和微量元 素等其他非糖成分.它的分子量大,结构复杂,普遍存在于 高等植物,细菌,真菌,藻类和动物体内.绝大多数多糖不 仅对正常细胞无毒副作用,而且能够提高机体的免疫功能, 具有抗病毒,抗辐射,抗癌,降血糖,减肥和清除氧化自由 基的作用].因此.多糖的研究引起人们的高度重视.但是, 目前多糖的研究主要以陆生植物为主,有些源于名贵中药, 这不利于多糖应用研究的进一步发展_2.随着人口的逐年增 加,陆生植物Et益匮乏,人们把目光投向有着巨大发展潜力 的海洋植物.物美价廉的海藻受到人们的关注_3J,作者以采 自广东湛江硇洲岛海域的野生半叶马尾藻为原料,用热水提 取法获得了半叶马尾藻多糖[SargassumHemiphyllum(Turn— er)C.Ag.Polysaccharides,SkIP],并对其理化性质,含量和 组成等进行了研究,以期为海藻的开发和利用提供实验依 据. 1材料与方法 1.1材料 1.1.1海藻来源 采自广东省湛江市的硇洲岛海域,由湛江海洋大学海洋 生物研究所汤学军博士鉴定为半叶马尾藻. 1.1.2试剂和仪器 D(+)一木糖为德国MERK公司产品,L(+)一阿拉伯糖 为美国SIGMA公司生产,其他试剂均为国产分析纯试剂. 收稿日期:2003—10—08.修订日期:2004一叭一16 基金项目:广东省湛江市科技重点攻关项目(9945)资助 作者简介:盂庆勇,1960年生,广东医学院分析中心副教授,博士 FS86-A型药物粉碎仪(浙江),UV-3101PC型uv_s—NIR 分光光度计(日本),R205B型旋转蒸发仪(上海),175C型傅 里叶变换红外光谱仪(美国),Megafuge1.0R型高速冷冻离 心机(德国),真空干燥器(美国). 1.2方法 1.2.1配制试剂 (1)Sevag溶液:按氯仿:正丁醇:4:1(),临用前配制. (2)DNS(3,5一Dinitrosalicylicacid;3,5-二硝基水杨酸)溶 液的配制:称取DNS7g,酒石酸钾钠182g,重蒸酚4g,氧 氧化钠15g,无水亚硫酸钠1g,混合加热溶解后定容为 1000mL,过滤备用.该溶液置棕色瓶中可稳定1周.溶液 组成为DNS(0.7%),苯酚(0.4%),亚硫酸钠(0.1%),氧氧 化钠(1.5%),酒石酸钾钠(18.2%). (3)层析展开剂:按正丁醇:乙酸乙酯:异丙醇:乙酸:水 :1:3:3:2:0.5(),临用前配制. (4)糖显色剂:称取1g二苯胺,加入1mL苯胺,待溶 解后加入50mL丙酮,最后加入5mLH1PO4,边滴边搅拌, 直至无混浊为止. (5)碘一碘化钾溶液:称取0.1g碘和1.0g碘化钾,用水 溶解后再加水至250mL. (6)茚三酮溶液:将2.5g茚三酮加入60mL冰醋酸和 40mL6mol-L磷酸中,加热溶解即成. (7)1000pg?mL葡萄糖标准溶液:称取0.5000g干 燥恒重后的葡萄糖(GR级),用水溶解,定容至500mL,即 为1000?mLI1的葡萄糖标准溶液. 1.2.2SHP的提取及理化性质 第l2期光谱学与光潜分析56I (1)SHP的提取:参考文献【4]取半叶马尾藻洗净击杂 物.70?烤干后粉碎,称