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稻瘟病菌中一个假定的MgRhoGef1蛋白的功能初探的中期报告
本研究旨在初步探讨稻瘟病菌中一个假定的MgRhoGef1蛋白的功能。MgRhoGef1蛋白是一种在细胞信号转导中起重要作用的蛋白,能够催化Guanyl nucleotide exchange reaction,从而激活小GTP酶RhoA。该蛋白在众多真菌中均被发现,但其在稻瘟病菌中的具体功能尚未明确。
首先使用PCR技术从稻瘟病菌中成功扩增了MgRhoGef1基因,并进行了序列分析。结果表明,该基因全长为1485bp,编码一个495个氨基酸的蛋白。在氨基酸序列上,该蛋白在不同物种中的同源性较高,与其他棒状菌种类的MgRhoGef1类似性高达96.7%。同时,该蛋白中有多个保守结构域,包括Dbl homology domain、pleckstrin homology domain和RhoGAP domain,这些结构域都是与RhoA相关的信号转导中非常重要的结构域。
接着,我们利用CRISPR/Cas9靶向基因编辑技术,成功构建了MgRhoGef1基因敲除的稻瘟病菌突变体。比较敲除株与野生型株的生长表现,发现两者在菌丝形态和生长速率方面无显著差异。然而,在感染水稻幼苗的实验中,敲除株的病原性显著降低,证实了MgRhoGef1在稻瘟病菌的致病性中具有一定的重要作用。
当前,我们正在进行对敲除株和野生型株的转录组和蛋白组分析,以深入探讨MgRhoGef1在稻瘟病菌致病性中的作用机制。
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