feuD基因和诱导型启动子PnisZ对nisin生物合成的影响研究的中期报告.docxVIP

feuD基因和诱导型启动子PnisZ对nisin生物合成的影响研究的中期报告 本研究旨在探究feuD基因和诱导型启动子PnisZ对nisin生物合成的影响。目前已完成实验的中期报告如下： 1. 构建PnisZ启动子引物和PCR核酸扩增 根据已知的Nisin生物合成途径，我们设计了PnisZ引物并进行PCR核酸扩增。扩增出的片段长度为666bp，与预期长度一致。这表明我们成功地构建了PnisZ引物，具备了后续实验的基础。 2. 制备含PnisZ启动子质粒和feuD基因质粒 我们选择pET28a作为质粒载体，将PnisZ启动子和feuD基因分别克隆进去。通过PCR验证，我们确定了带有目标片段的质粒，同时进行了测序验证，确保克隆的正确性。 3. 转化E.coli BL21(DE3)菌株和表达检测 我们将含有目标质粒的E.coli BL21(DE3)菌株进行表达，在以IPTG作为诱导剂下，通过SDS和Western blot检测，确认了feuD基因的表达并定位到了膜上，同时PnisZ启动子也对nisin的生物合成有促进作用。 4. 正在进行的实验 当前，我们正在对feuD基因和PnisZ启动子对nisin生物合成的影响进行进一步研究。我们将继续进行表达检测及其它实验，以便更全面、深入地了解它们对nisin生物合成的影响。 综上，我们已经完成了PnisZ引物设计、PCR扩增、质粒构建、菌株表达、Western blot表达检测等多项实验，并初步得到了一些有价值的结果。这些结果将有助于我们深入研究feuD基因和PnisZ启动子对nisin生物合成的影响。