DA品系大鼠胚胎干细胞系的建立及多能性检测的中期报告.docx

DA品系大鼠胚胎干细胞系的建立及多能性检测的中期报告 本报告介绍了DA品系大鼠胚胎干细胞系的建立及多能性检测的中期结果。 首先，我们从DA品系大鼠的胚胎中获得了内质网标记蛋白3（ERGIC3）-绿色荧光蛋白（GFP）转基因胚胎。采用牛血清及LIF诱导，获得了初级胚胎干细胞（PESCs），并通过免疫染色检测证实细胞为典型的胚胎干细胞。 接着，我们使用足球形体培养细胞转化技术（spheroid body culture）将PESCs分化成三胚层。通过细胞形态学及免疫染色分析，证实了分化出的外胚层、中胚层及内胚层细胞的存在。同时，通过RT-PCR分析，证实了这些分化细胞的基因表达具有相应的胚胎发育时期标志。 最后，我们进行了多能性检测。使用细胞发光酶三磷酸酯酶（Alkaline phosphatase）染色及flow cytometry检测，证实了PESCs为典型的多能干细胞。同时，分化出的三胚层细胞也表现出了相应的分化能力。 综合来看，我们成功建立了DA品系大鼠胚胎干细胞系，并证明了其具有多能性。这将为后续的胚胎干细胞研究提供重要的基础。