实验10-邻二氮菲分光光度法测铁.docx

实验十邻二氮菲分光光度法测足铁一、实验目的了解分光光度计的结构和使用方法；掌握用吸光光度法测定铁的原理和方法。 二、实验原理 在可见光区进行吸光光度测量，如果被测组分本身很浅，或者无色，那么就要用显色剂与其反应，生成有色化合物，然后进行测量。 用光度法测定铁，显色剂种类较多，邻二氮菲光度法测铁，由于灵敏度较高，稳定性较好，干扰容易消除，因而目前普遍采用的一种测定方法。 在pH为2?9的溶液中，邻二氮菲与Fe2+反应生成稳定的橙红色络合物: Fe2++3Fe在pH=2?9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰， Fe2++3 Fe 摩尔吸收系数为1.1X104,反应十分灵敏，Fe2+浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。 实验中，采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。 三、试剂和仪器试剂：1.00x10-3ug/mL的铁标液、1mol/L的NaAc溶液、100g/L的盐酸羟胺溶液、1mol/L的NaAc溶液。 仪器：50mL容量瓶、2.00mL、10mL、25.00mL吸量管、通用滴定管、玻璃比色皿、分光光度计 四、实验过程 1、吸收曲线的绘制 用吸量管吸取10mL1.00x10-3ug/mL的铁标准溶液于50mL容量瓶中，加入1ml100g/L的盐酸羟胺溶液，摇匀，再加入2mL1.5g/L邻二氮菲溶液、5mL1mol/L的NaAc溶液，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置十分钟。在可见光分光光度计上，用1cm的比色皿，以蒸馏水为参比溶液，从450nm至550nm每改变10nm测定一次吸光度。绘制A?久吸收曲线。找出最大吸收波长。 2、标准曲线的绘制标准溶液及样品溶液的配制: 编号 0 1 2 3 4 5 6（补血盐） 10Ag/mL标准铁溶液 0.00ml 2.00ml 4.00ml 6.00ml 8.00ml 10.00ml 5.00mL 100g/L盐酸羟胺溶液 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.00ml 1.5g/L邻二氮菲溶液 2.00ml 2.00ml 2.00ml 2.00ml 2.00ml 2.00ml 2.00ml NaAC缓冲溶液 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 5.00ml 说明 以上溶液均用移液管移取至50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度并摇匀。放置10min. 在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以0号溶液作为参比溶液，分别测定1至5号溶液的吸光度，绘制标准曲线。并在最大吸收波长处测定未知样品的吸光度，根据吸光度找出相应的铁含量。五、实验数据和结果表1吸收曲线的绘制（蒸馏水作参比） 波长久/nm 吸光度/A 450 0.065 460 0.071 470 0.077 480 0.079 490 0.081 500 0.084 502 0.085 504 0.086 506 0.087 508 0.087 510 0.087 512 0.087 514 0.086 516 0.085 518 0.083 520 0.080 530 0.064 540 0.043 550 0.026  A图1吸收曲线表1吸收曲线的绘制（试剂空白作参比） 波长A/nm 吸光度/A 450 0.063 460 0.068 470 0.074 480 0.076 490 0.078 500 0.081 502 0.082 504 0.083 506 0.083 508 0.084 510 0.084 512 0.083 514 0.082 516 0.081 518 0.080 520 0.076 530 0.060 540 0.040 550 0.023  图2吸收曲线从吸收曲线图1可以看出邻二氮菲-亚铁配合物在波长510nm处吸光度最大，因此测定铁时宜用波长为510nm。 表2标准曲线的绘制及铁含量测定 编号 1 2 3 4 5 补血盐 铁的浓度/Mg?mL-1 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 1.575 吸光度/A 0.079 0.162 0.245 0.322 0.404 0.317 图3标准曲线从该曲线的线性方程可以算出未知液中铁的含量为1.575mgmL-1,0.5002g补血盐含铁量为78.75Mg,即补血盐中铁的质量分数为0.016%。 六实验指导要点比色皿在换装不同浓度的溶液时，必须用待测的溶液润洗至少三次。 比色皿放入分光光度计样品室钱，必须用吸收纸将表面擦拭干净。 在换用不同波长测吸光度时必须重新调节透射比为100%。 主要试剂使用说明1