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内皮抑素的测定及其生物活性研究 肿瘤的生长与血管生成依赖。原发肿瘤的生长、浸润和转移均需要新生血管, 因而, 肿瘤的抗血管生成治疗是近年来肿瘤治疗研究中的一个热点。1997年, O′Reilly等在鼠内皮瘤细胞培养液中发现了一种新的、分子量为20kD的蛋白质。体外实验表明它能特异性地抑制内皮细胞增生, 并呈剂量依赖性, 这一新的血管抑制因子被命名为内皮抑素 (Endostatin, ES) 。ES优良的生物活性, 使之在肿瘤抗血管生成治疗中展示了诱人的前景。本研究试图建立131I标记ES的方法, 为ES的临床应用研究提供新的思路。 1 材料和方法 1.1 人瑶静脉内皮细胞系 ES购自Sigma公司,131I由北京原子高科公司提供;Iodogen为Pierce公司产品。人脐静脉内皮细胞系 (ECV304) 购于上海细胞生物学研究所;MTT (四唑盐) 购自北京鼎国生物公司。 1.2 实验方法 1.2.1 iofigen薄膜的制备 ①涂管:称取0.5 mg Iodogen溶于0.25 ml二氯甲烷内, 分别取上述溶液30 μl (约含50 μg Iodogen) 分装在各反应试管内, 室温自然干燥, 使管底形成一层Iodogen薄膜, -20 ℃避光保存;②碘化标记:含有Iodogen膜的反应管内, 加入0.3 M磷酸盐缓冲液, 加入待标记ES样品, 再加入无载体131I, 混匀,