DB22-T 3494-2023茄子抗褐纹病鉴定技术规程.pdfVIP

ICS 65.020 CCS B 05 22 吉 林 省 地 方 标 准 DB22/T 3494—2023 茄子抗褐纹病鉴定技术规程 Technical code of practice for resistance evaluation of eggplant cultivars to Phomopsis blight 2023-09-28 发布 2023-11-16 实施 吉林省市场监督管理厅 发 布 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由吉林农业大学提出。 本文件由吉林省农业农村厅归口。 本文件起草单位：吉林农业大学、吉林农业科技学院、辽宁省桓仁满族自治县农业发展服务中心。 本文件主要起草人：陈姗姗、赵春波、韩玉珠、李爽、赵靖、段微、吴春燕、于占东、张莹、曹鑫、 任瑞敏。 茄子抗褐纹病鉴定技术规程 1 范围 本文件确立了茄子抗褐纹病鉴定的程序，规定了接种体制备、育苗、接种鉴定、病情调查、抗性评 价等阶段的操作指示，描述了过程记录的追溯方法。 本文件适用于茄子品种资源对茄子抗褐纹病的室内鉴定及评价。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 茄子褐纹病 Phomopsis blight of eggplant 由半知菌类真菌茄褐纹拟茎点霉 （有性态Diaporthe vexans 、无性态 Phomopsis vexans ）引起的一 种真菌病害。 3.2 抗病性 disease resistance 茄子品种（系）所具有的能够抵御或减轻茄子褐纹病侵染和危害的可遗传性状。 3.3 接种体 inoculum 用于接种茄子以引起茄子褐纹病的分生孢子或菌丝体。 3.4 病情指数 disease index （DI） 全面考虑发病率与严重度两者的综合指标。 4 程序框 图1 茄子抗褐纹病鉴定程序流程 5 接种体制备 5.1 病原物分离和纯化 采用常规组织分离法。从典型病斑的病健交界处，用无菌刀片切取 5 mm×10 mm 的病组织，75% 乙 醇消毒 30 s，无菌水冲洗 3 次～4 次，用无菌滤纸吸干组织块表面水分，置于马铃薯葡萄糖琼脂（PDA） 培养基中，每皿接入 3 块～5 块，用封口膜将培养皿封口后置入 25 ℃ 恒温箱中暗培养。待长出分生 孢子器后，单孢法纯化获得纯培养物。 5.2 茄子褐纹病菌的鉴定和保存 对经过柯氏证病法则验证的有致病性的分离物进行形态学观察。与茄子褐纹病菌（见附录 A）形态 一致的分离物编号，用滤纸片法 -20 ℃ 冰箱长期保存菌种。 5.3 接种体的繁殖和保存 5.3.1 将菌种转接于 PDA 培养基，置于 25 ℃ 恒温箱中培养 7 天后，用内径为 6 mm 的打孔器从菌 落边缘打取菌饼，转接于 PDA 平板，培养至 21 天长出分生孢子器。 5.3.2 用无菌的镊子夹取分生孢子器置于双层无菌载玻片压碎后，用少量无菌水冲洗，制成孢子悬液。 7 在光学显微镜下使用血球计数板对菌悬液中的孢子进行计数，配成 1×10 个/mL 的孢子悬浮液待用。 6 育苗 6.1 将试验种子放入 10% 磷酸三钠溶液，或 0.1% 高锰酸钾溶液中浸种 20 分钟