人类甜味受体蛋白T1R2T1R3胞外端的真核表达、纯化和鉴定的中期报告.docxVIP

人类甜味受体蛋白T1R2T1R3胞外端的真核表达、纯化和鉴定的中期报告 人类甜味受体蛋白T1R2T1R3（hT1R2-hT1R3）是一种异二聚体膜蛋白，在味道感受中发挥着重要作用。本研究旨在表达、纯化和鉴定hT1R2-hT1R3的胞外端，为进一步研究该受体的结构和功能提供基础。 方法：首先通过基因合成获得hT1R2-hT1R3的胞外端基因，将其克隆到真核表达载体pPIC9K中。然后利用脂质体介导法将重组质粒导入到毕赤酵母（Pichia pastoris）中，经过诱导表达和培养后，利用亲和层析技术纯化得到hT1R2-hT1R3的胞外端。最后通过SDS和Western blotting等方法鉴定纯化后的蛋白。 结果：通过基因合成和克隆，成功将hT1R2-hT1R3的胞外端基因克隆到真核表达载体pPIC9K中。经过重组质粒导入到毕赤酵母、诱导表达和培养，成功高效表达并纯化出hT1R2-hT1R3的胞外端。经过SDS和Western blotting等方法鉴定，得到了高纯度的hT1R2-hT1R3胞外端蛋白。 结论：本研究成功表达、纯化和鉴定了hT1R2-hT1R3的胞外端蛋白，为后续研究该甜味受体蛋白的结构和功能提供了基础。