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不同深决方案对猪深决性皮肤损伤的临床研究 烧灼伤是一种常见的外科损伤，大多数烧伤群体出现在2度以下的小区域。建立符合临床发病过程和建立符合创面主要因素的动物模型，观察皮肤的修复情况，是研究创伤愈合机理与评价创伤修复药物的基础。研究烧烫伤动物模型应选用与人体结构、功能、代谢及疾病特征相似的动物，这是保证实验成功的关键。小型猪皮肤组织结构与人类很相似，是进行各种皮肤创伤动物模型制备的理想选择。本研究通过使用烫伤和烧伤两种方法制备了深二度皮肤创伤模型，并比较两者的异同。 1 材料和方法 1.1 实验动物环境 五指山小型猪，普通级，4头，雄性，由广东大华农动物保健品股份有限公司提供，合格证号:0051252。普通级五指山小型猪饲养在广东省医学实验动物中心普通级实验动物室，动物实验环境设施合格证号:SYXK(粤)2008-0002，室内保持19～28℃，自由饮水、进食，水料充足，普通级猪饲料由广东省医学实验动物中心提供。该实验通过了广东省医学实验动物中心实验动物伦理委员会的审核，编号为0905L。 1.2 主要机械机机 100 kg电子秤:常熟市双杰测试仪器厂，型号TC100K;轮转切片机，德国LEICA公司产品，型号RM2135;生物组织全自动脱水机，湖北孝感医用仪器有限公司产品，型号TS-12N;生物组织包埋机及冷冻机，湖北孝感医用仪器有限公司产品，型号BM-VII;摊片烤片机，湖北孝感医用仪器有限公司产品，型号CS-VI;生物组织全自动染色机，湖北孝感医用仪器有限公司，型号RS-18;病理图像分析系统，日本奥林巴斯公司产品，型号BX41。 1.3 实验方法 1.3.1 新麻醉模型组 五指山小型猪，4头，体质量18～23 kg，雄性。实验前动物背部去毛，腹腔注射3%戊巴比妥钠10 mL，肌肉注射5 mL速眠新麻醉。用烧伤仪于92℃下，持续接触12 s，压力约1 kg，于每头猪背部两侧各烫灼2个深二度烧伤创面，垂直于脊柱。将沾有无水乙醇的4 cm×5 cm纱布贴敷在去毛位置，点火燃烧18 s，于每头猪背部两侧各烧灼形成2个深二度烧伤创面，8例/组。烫伤模型组和烧伤模型组涂抹蒸馏水，1次/日。术后肌注80万单位青霉素钠1次，单笼饲养，密切观察动物全身及局部情况。 1.3.2 原始创伤率的测定 分别于造模后第7天、14天、21天和28天参照Nagelschmidt法计算创面愈合率:用透明的称量纸覆盖在动物的背部创面，将创面边缘和愈合创面边缘描绘在透明的称量纸上，剪去多余创面边缘的纸片，称得原始创面纸片质量;剪下未愈合创面的纸片，称得未愈合创面纸片质量，计算创面愈合率: 1.3.3 病理检验方法 1.3.3. 1.恢复 于造模后第1天、7天、14天、21天、28天分别取创面小部分标本，甲醛固定，制成石蜡切片，HE染色，光镜下观察创面修复情况。 1.3.3. 组织病理学检测指标 1)造模后1天的病理检查标准:表皮及真皮浅层是否完全坏死形成焦痂，其下真皮胶原纤维肿胀变性呈均质性条索状，毛细血管是否高度扩张充盈。分布在真皮浅层的皮肤附件(毛囊、汗腺等)部分受损，深部皮肤附件保存完好，创面有炎症细胞浸润。2)造模后第7天病理观察指标:创面表皮全层坏死脱落严重，坏死组织呈凝固性坏死，真皮浅层见增生的成纤维细胞及毛细血管细胞条索，伴少量炎细胞浸润，局灶形成幼稚肉芽组织，部分创面新生表皮覆盖程度和局灶上皮岛增生情况。3)第14天病理观察指标:创面由新生表皮部分或完全覆盖，真皮浅层中见增生的成纤维细胞和毛细血管内皮细胞条索或真皮浅层中见增生的成纤维细胞和毛细血管，表皮中基底层、棘细胞层、颗粒层、角质层各层细胞成熟程度，局灶上皮岛增生情况。4)造模后第21天和第28天的病理观察指标:创面由新生表皮完全覆盖，真皮浅层中见增生的成纤维细胞和毛细血管，伴不等数量的炎细胞浸润，表皮中基底层、棘细胞层、颗粒层、角质层各层细胞成熟程度，毛囊增生情况。 1.3.3. 组织结构检查 1)表皮成熟度:-:表皮层次结构由基底层、棘细胞层、角质层构成，棘细胞层中细胞幼稚;+:表皮层次结构由基底层、棘细胞层、角质层构成，棘细胞层中细胞成熟;++:表皮层次结构由基底层、棘细胞层、颗粒层、角质层构成，棘细胞层中细胞成熟，颗粒层中细胞幼稚;+++:表皮层次结构由基底层、棘细胞层、颗粒层、角质层构成，棘细胞层中细胞成熟，颗粒层中细胞成熟。2)成纤维细胞数量、新生毛细血管数量、炎细胞数量:+:少量;++:中等量;+++:大量。3)毛囊增生:-:毛囊增生不活跃;+:毛囊增生活跃。 1.4 统计方法 两样本均数差用t检验，数据用表示;分值等级差异用Ridit分析，数据用样本例数(n)表示。 2 损伤情况的愈合率 2.1 深二度烫伤和深二度烧伤皮肤的大体观察比较大体观察结果见表1。 2.2 烧伤