原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
颗粒裂解肽抗菌结构域的重组表达和生物学活性分析的中期报告
本项目旨在利用重组表达技术制备颗粒裂解肽抗菌结构域，并对其进行生物学活性鉴定。
项目进展情况：
1. 文献查阅：通过查阅相关文献，了解颗粒裂解肽抗菌结构域的基本概念、生物学功能及应用研究进展。
2. 基因克隆：基于已有文献报道的颗粒裂解肽抗菌结构域序列设计引物，从大肠杆菌中提取基因组DNA进行PCR扩增，获得了目标基因的全长序列。
3. 质粒构建：将目标基因克隆到表达载体pET-30a(+)中，构建了重组表达质粒pET-30a-PGRP-L 。
4. 转化大肠杆菌：将重组表达质粒转化进入大肠杆菌BL21(DE3)细胞中，并进行蓝白斑筛选，最终得到正确的克隆菌株。
5. 蛋白表达与纯化：选用IPTG诱导表达，并通过亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等多步骤纯化得到了目标蛋白，免疫印迹分析证明其表达量高、纯度高。
6. 抗菌活性测试：利用二氢四氮唑（2,3,5-三苯基四氮唑）抑菌圈形成实验和最小抑菌浓度（MIC）测定法对重组蛋白的抗菌活性进行初步测试。
未来计划：
1. 继续对表达蛋白进行生物学活性的检测，包括抗菌谱、稳定性和毒性等方面的研究。
2. 进一步深入探究颗粒裂解肽抗菌结构域的结构与功能关系，探索其在抗菌领域的应用潜力。
3. 拟在细胞水平对研究对象进行观察和分析，以探究其进入靶细胞的机制及作用机制，为其药物研发和应用提供基础和参考。
文档评论（0）