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峰王浆多肽的制备及其对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用的中期报告 摘要： 本研究通过对峰王浆的提取和分离，制备了峰王浆多肽，使用MTT法测定峰王浆多肽对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。实验结果表明，峰王浆多肽处理后，凋亡率和ROS产生都减少了，而且能够显著地降低Aβ样蛋白对SH-SY5Y细胞的毒性。这些结果表明峰王浆多肽可能具有保护神经细胞免于Aβ样蛋白毒性的作用，而且具有良好的应用前景。 关键词：峰王浆，多肽，Aβ，SH-SY5Y，细胞凋亡，保护作用。 研究背景： β-淀粉样蛋白(Aβ)在阿尔茨海默病和老年痴呆症的发病中扮演着重要的角色。Aβ的沉积是造成神经细胞死亡和神经网络功能异常的主要原因。因此，寻找抑制Aβ诱导的神经细胞凋亡的有效方法具有重要的意义。 峰王浆是一种常见的高山植物，被认为具有多种药用功效。研究表明，峰王浆可以提高神经元活性，具有保护神经元的作用。而峰王浆多肽是峰王浆中的主要活性成分之一，具有多种生物活性。 因此，本研究旨在制备峰王浆多肽，探究其对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用，为峰王浆多肽的应用开拓新途径。 研究方法： 1.峰王浆多肽的制备：以酸水解为基础的固相肽化学法制备峰王浆多肽。使用LC-MS方法检测和鉴定峰王浆多肽的组成和分子量。 2.细胞培养和处理：使用SH-SY5Y细胞模型进行研究。将细胞接种在96孔板中，进行不同浓度的处理。 3.评估细胞生存率：通过MTT比色法检测细胞的活力。 4.色素沉淀实验：使用乙醇/乙酸盐液对沉淀的细胞进行染色。 5.细胞凋亡检测：使用Annexin V-FITC/PI标记检测细胞凋亡率。 6.ROS产生的检测：使用DCFH-DA检测ROS产生。 研究结果： 1.成功地制备了峰王浆多肽，分子量为2389.16Da。 2.峰王浆多肽处理后，Aβ诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡率和ROS产生都减少了，而且能够显著地降低Aβ样蛋白对SH-SY5Y细胞的毒性。 3.通过色素沉淀实验和细胞凋亡检测，进一步证实了峰王浆多肽对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。 结论： 综上所述，本研究成功地制备了峰王浆多肽，并发现其具有保护神经细胞免于Aβ样蛋白毒性的作用。这些结果表明峰王浆多肽可能具有治疗阿尔茨海默病和老年痴呆症的潜力，但还需要进一步研究。