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拟南芥GA2oxl基因超量表达对矮牵牛株型的影响及其茎特异表达载体构建的中期报告
本研究旨在探究拟南芥GA2oxl基因超量表达对矮牵牛株型的影响,并构建其茎特异表达载体。目前已完成以下工作:
1.克隆拟南芥GA2oxl基因并进行限制酶切验证。利用PCR方法从拟南芥基因组DNA中扩增了GA2oxl基因的全长序列,将其克隆到T载体上并进行了EcoRI和XhoI的双酶切验证。
2.初步筛选了转化拟南芥的阳性株系。采用农杆菌相关法转化拟南芥,将GA2oxl基因植入植物基因组中并将转化后的植株进行筛选,初步筛选出了多个阳性株系。
3.进行了对矮牵牛株型的形态学观察。观察野生型矮牵牛和阳性转化株系的株型,初步发现阳性转化株系的茎部矮化程度明显增加,说明GA2oxl基因超量表达可能会对矮牵牛的株型产生影响。
4.进行了茎特异表达载体构建的尝试。利用PCR从拟南芥基因组DNA中扩增了茎特异基因的启动子和3UTR序列,将其克隆到pCAMBIA1302载体中并构建出茎特异表达载体。
下一步计划进行转录组测序及不同发育阶段矮牵牛各组织GA2oxl基因表达的定量分析,以深入探究GA2oxl基因超量表达对矮牵牛株型的影响及茎特异表达载体的表达效果。
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