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酸性纤维素酶水解性能的研究 0 纤维素酶lg 纤维素酶是一个酶总称，它可以促进纤维素的分解，产生葡萄糖，并从各种微生物和动植物中提取。纤维素酶主要由三种不同性质的酶组成,即内切葡聚糖酶(EG,Endo-β-1,4-Glucanase)、外切葡聚糖酶(CBH,Cellobiohydrolase)和β-葡萄糖苷酶(BG,β-1,4-Glucanase),三者协同对纤维素发生催化水解作用。纺织工业常用的纤维素酶分为酸性、中性和弱碱性等,一般常用酸性和中性纤维素酶。酸性纤维素酶一般来自里氏木霉(Trichoderma reesei),最适pH值为4.5～5.5,活力较高,对纤维素纤维有高度的侵蚀作用;中性纤维素酶主要是由特异腐质霉(Humicola insolens)制得,最适pH值为7.0,活力较低。 纤维素酶作为一种催化剂,其对纤维素水解的催化能力受各种因素的影响。本研究采用不同的纤维素织物作为水解底物,研究酸性酶浓度、底物浓度、缓冲体系、搅拌条件等对酸性纤维素酶水解性能的影响。 1 测试 1.1 天丝、提纯针织布 织物 经前处理的粘胶针织布(140 g/m2)、天丝针织布(120 g/m2)、纯棉针织布(140 g/m2);纯棉卡其坯布(26×33,503×236)。 试剂 酸性纤维素酶、中温淀粉酶(杰能科)。 1.2 试验设备 722型分光光度计、Rapid小型染色机、CS101-AB型电热鼓风干燥箱、电子天平、酸度计、织物电子强力仪。 1.3 织物煮练和活化 退浆 将待处理的纯棉卡其布置于3 g/L的淀粉酶溶液中,酶液pH值调至5,浴比30∶1,在50 ℃条件下处理30 min;取出,自来水冲洗并晾干。 煮练 配制含氢氧化钠20 g/L、高效精练剂2 g/L的煮练液,对经退浆的卡其布进行煮练(浴比30∶1,煮练温度100 ℃,煮练时间120 min),取出,分别经高温水、中温水和冷水洗涤,晾干待用。 漂白 漂白液含100%双氧水5 g/L、氧漂稳定剂1 g/L,用氢氧化钠调节pH值至11,对煮练后的织物进行漂白(浴比30∶1,漂白温度98 ℃,漂白时间60 min),取出,用自来水充分洗涤,晾干待用。 丝光 配制250 g/L碱液,对漂白后织物进行室温丝光(时间5 min,带张力,用80～90 ℃热水洗5 min,洗两次),从丝光架上取下织物,冷水洗,2 g/L硫酸中和5 min,最后充分水洗,晾干待用。 1.4 纤维素织物染色剂的制备 配制不同浓度的纤维素酶溶液,用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液调节pH值至4.8,将一定质量的纤维素织物(浴比50∶1)投入溶液,在小型染色机中于50 ℃下处理30 min。取出织物,以DNS(3,5-二硝基水杨酸)法测溶液中还原糖含量。 2 结果与讨论 2.1 溶液结构对还原糖含量的影响 分别以经前处理的纯棉、粘胶和天丝针织物作为水解底物,研究酸性酶对不同类型纤维素织物的水解性能,结果见图1。 由图1知,酸性酶对不同纤维素表现出不同的水解性能。普通粘胶纤维分子聚合度低,一般为250～300,且结晶度只有30%左右,结构疏松,对酶蛋白的饱和吸附量大,对酶水解最为敏感,因此酸性酶对粘胶织物的水解能力最强;纯棉纤维的分子聚合度、结晶度和取向度等都明显高于普通粘胶纤维,在相同条件下对酶水解的耐受性较高,因此溶液中的还原糖含量相对较低;天丝的聚合度和结晶度虽然较棉纤维略低,但因其大分子高度取向,强度等物理机械性能超过棉纤维,同时高度的取向也限制了酶蛋白的水解能力,因此在溶液中所检测出的还原糖含量最低。 上述结果表明,酶对具有不同内部结构(尤其是聚集态结构)的纤维素纤维织物的水解性能差异较大,在处理各种纤维素混纺织物时要加以注意,以免因对某些组分水解程度过高而造成损伤。 2.2 棉织物的吸湿排汗整理 将棉卡其坯布以及分别经过退浆、煮练、漂白、丝光的织物进行酶处理,结果见图2。 由图2可以看出,棉织物所受的前处理程度越大,越易被酸性酶水解。棉坯布表面由于含有大量的浆料、蜡质、果胶和色素等杂质,吸水性非常差,水分不能]更不易进入纤维内部,与纤维的接触不充分,故对棉坯布的水解程度非常低;棉织物退浆后,大部分浆料被去除,吸水性提高,酶与织物的接触几率增大,水解程度提高;棉织物经过煮练、漂白后,大多数杂质已被去除,限制酶蛋白水解活力的因素大大减少,水解程度进一步增大;棉织物经过碱丝光后,纤维内部的晶格发生一定程度的改变,纤维的形态结构和聚集态结构都发生不可逆的变化,结晶度由70%左右降为50%左右,酶蛋白对纤维的可及度增大,水解程度提高。 2.3 酶浓度对织物水解性能的影响 将经漂白处理后的纯棉卡其布置于不同浓度的酸性纤维素酶溶液中进行处理,研究酶浓度对水解性能的影响,结果见图3。 由图3可以看出,随着酶浓度增加,所