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NIRF蛋白对HBV核心蛋白的作用及其机制的初步研究的中期报告
本研究的目的是探讨NIRF蛋白对HBV核心蛋白的作用及其机制。在前期实验中,我们已经成功地克隆了NIRF蛋白和HBV核心蛋白的基因,并构建了相应的表达载体。
在本次中期报告中,我们主要进行了以下几个方面的研究:
1.蛋白表达和纯化
我们将NIRF蛋白和HBV核心蛋白的表达载体分别转染到HEK293T细胞中,经过Western blot检测,发现NIRF蛋白和HBV核心蛋白在细胞中均得到了较好的表达。接着,我们利用His-tag纯化NIRF蛋白和HBV核心蛋白,并进行了SDS分析。
2.蛋白相互作用研究
采用GST pull-down实验和Co-IP实验,我们进一步确定了NIRF蛋白与HBV核心蛋白之间的相互作用关系。结果表明,NIRF蛋白能与HBV核心蛋白形成复合物,并且这种相互作用是比较稳定的。
3.细胞共定位研究
我们将NIRF蛋白和HBV核心蛋白共同转染到HEK293T细胞中,并进行免疫荧光染色分析。结果表明,NIRF蛋白和HBV核心蛋白可以在细胞内共同定位于细胞核。
4.功能验证实验的开展
我们已经开始进行相关的功能验证实验,例如通过RNA干扰技术降低NIRF蛋白的表达,观察其对HBV核心蛋白表达和病毒复制的影响,以及利用荧光传感器监测NIRF蛋白和HBV核心蛋白相互作用的变化。
总之,我们的研究初步揭示了NIRF蛋白与HBV核心蛋白之间的相互作用,并且进一步探讨了它们在细胞内的共定位情况。接下来,我们将进一步深入研究它们之间的作用机制,为治疗HBV感染提供新的思路和方法。
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