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革兰氏染色;主要内容; 细菌的染色原理;A 简单染色法:即用一种染液染色菌体,一般菌体被染上染料颜色。此法常用来观察细菌的形态、大小和排列方式。
; C.Gram(革兰)于1884年
发明的一种鉴别不同类型
细菌的染色方法根据此染
色法,细菌可分为革兰氏
阳性菌和革兰氏阴性菌 。; 革兰氏染色步骤;阳性菌;(1)与等电点有关:
革兰氏阳性菌pH 2~3,阴性菌pH 4~5,加碘液媒染,等电点降低,阳性菌降低的更低,与结晶紫结合得更牢固;阴性菌结合力弱,易被乙醇脱色。;(2)与细胞壁有关:;;(2)与细胞壁有关:
一般认为在革兰染色的过程中,细菌细胞内形成了一种不溶性的深紫
色的结晶紫-碘的复合物,这种复合物可被乙醇从G-菌中浸出,但不易从G+菌中浸出。这是由于G+菌细胞壁较厚,肽聚糖含量较高,网格结构紧密,含脂量又低,当用乙醇脱色时,肽聚糖网孔由于缩水会明显收缩,从而使结晶紫-碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内,故菌体呈深紫色。而G-细胞壁薄,肽聚糖含量低,且网格结构疏松,故遇乙醇后,其网孔不易收缩,加上G-菌的脂类含量高,当用乙醇脱色时,脂类物质溶解,细胞壁透性增大,因此,结晶紫-碘的复合物就容易被洗脱出来,故菌体呈复染液的红色。
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