[生物学]18免疫学检测与免疫学技术.pptxVIP

免疫学检测与免疫学技术;一、概述 免疫学检测是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验手段及分子生物学技术在免疫学研究中的应用。 免疫学技术的应用极为广泛,疾病的诊断、疗效评价及理论研究等。 二、抗原抗体的检测技术 *根据反应的基本原理与表现主要分为凝集反应、沉淀反应和补体参与的各种反应 ¨ *根据抗原抗体反应设计的试验还有标记抗原(或抗体)检测相应物质的标记技术。;对机体参与免疫应答的细胞进行鉴定,计数及功能测定 (一)细胞计数 荧光抗体染色 免疫酶染色技术: *ABC法*APAAP法 免疫金银染色法(IGSS) 免疫细胞化学法 四聚体法 TCR 链测定;¨ (二)免疫细胞功能的测定;¨ 2. B细胞功能判定 ¨ (1)B细胞增殖(转化)试验： ¨ *PWM、SAC，LPS（对小鼠B细胞）； ¨ *抗IgM抗体及EB病毒等 ¨ (2)溶血空斑形成试验 ¨ (3)反向溶血空斑试验 ¨ (4)酶联免疫斑点法(ELISPOT):ELISPOT是一种可检测抗体分泌细胞，又可测定抗体分泌量的体外实验方法。 ¨ *此法的主要优点是: ¨ ① 稳定、特异，且抗原用量少； ¨ ②可同时检测不同抗原诱导的抗体分泌，并可定量测定； ¨ ③可检测组织切片中分泌抗体的单个细胞。;¨ 3. NK细胞活性测定;¨ (4)化学发光法 ¨ (5)流式细胞术：应用FCM检测NK