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赖草属植物Myb基因的克隆及分子性状分析的中期报告
本研究旨在克隆赖草属植物中的Myb基因,并分析其分子性状。本阶段的研究主要工作是从赖草(Lolium perenne L.)中克隆Myb基因的序列,并进行序列分析。
首先,从赖草的根、茎和叶中提取总RNA,逆转录合成cDNA。然后使用已知的Myb基因保守区域设计一对引物,进行PCR扩增。最终获得了一个长约800bp的扩增产物。将该产物克隆到pMD19-T载体中,进行测序。
经序列分析,获得了赖草Myb基因的完整序列。该序列长约1.5kb,编码大约500个氨基酸。使用BLAST软件比对,发现赖草Myb基因与其他物种的Myb基因序列有高度相似性。进一步使用软件分析,推测该Myb基因含有R2、R3、R2R3等多个结构域。
另外,还通过实时荧光定量PCR技术,研究了赖草Myb基因在不同组织和不同处理条件下的表达情况。初步结果显示,在茎、叶和根中,赖草Myb基因均有表达,并且在不同组织中表达量有差异。同时,在干旱处理和低温处理条件下,赖草Myb基因表达水平也有变化,表明该基因可能参与调节赖草对环境压力的响应。
综上所述,本阶段的研究成功克隆了赖草Myb基因,并初步分析了该基因的分子性状。下一步工作将进一步探究赖草Myb基因的功能和调控机制。
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