薄层色谱方法课件.pptxVIP

  1. 1、本文档共49页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  5. 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  6. 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  7. 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  8. 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
薄层色谱法(TLC) 1 ( 一) 平面色谱法的概念 平面色谱法是将固定相涂布于平面载板上, 流动相借毛细管作用流经固定相,使被分离后 的物质保留在固定相上的一种色谱方法。 薄层色谱法是将被分离物质点在将固定相均 匀涂布于玻璃板、铝箔或塑料片上形成的薄层上 而进行分离的。 一、薄层色谱法的概述 薄层色谱 平面色谱 纸色谱 2 薄层色谱 高效液相色谱 色谱系统 开放式 闭路 展开方式 展开 洗脱 流速控制 吸附剂的毛细管作用 由泵调节 平衡时间 短 不定 分析样品 可同时分析多个样品 每次一个样品 样品量 高 低 板高 ( μm) 30 2~5 有效板数 <600 ~5000 检测方式 静态 动态 溶剂用量 少 多 溶剂更换 易 难 固定相 一次弃去 反复使用 3 (二) 薄层色谱与高效液相色谱的比较 二、薄层色谱法的技术参数 薄层色谱法的技术参数包括分配系数与容量因 子,理论塔板数与塔板高度,分离度,保留值等。 薄层色谱保留值表示方式有:比移值(Rf) 比移值是溶质移动距离与流动相移动距 离之比,是薄层色谱的基本定性参数。 4 当Rf=0时,表示组分留在 原点未被展开;当Rf=1时,表 示组分随展开剂至前沿,即组 分不被固定相吸附,所以Rf值 只能在0~1之间。通常Rf值在 0.2~0.8之间较适宜。 高比移值 (hRf=100×Rf) 5 三、薄层色谱法的基本操作 薄层板的准备 定性与定量 样品处理 定位 展开 6 ( 一) 薄层板 制备薄层板的载板包括有:玻璃板、塑 为制了薄使层薄板 定附相着有在在:: 上化便铝 素素,,、需聚要酰时胺 凝定胶相等中中,, 色的谱粘法 需在固定相中加入某些添加剂。 固固;; 为相 %殊以 离离或工检作出都 ,, 有。时也 7 料片和铝箔。 1、固定相 普通硅胶和改性硅胶两种类型。 ①普通硅胶 硅胶为多孔性无定形粉末,表面有硅醇基成弱 酸性 (pH=4.5),通过硅原子上的-OH基与极性化合 物或不饱和化合物形成氢键而表现其吸附性能。有 效的硅醇基数目越多,其吸附能力越强。 ( 1)硅胶 8 ② 改性硅胶 改性硅胶是借化学反应的方法,将有机分子以共 价键连接在硅胶的硅醇基上,因此称为化学键合固定 键合有机分子中含有某种极性基团,和 普通硅胶比,吸附活性降低。 硅胶的分离效率的高低与其粒度、孔径及表面 键合相表面都是极性很小的烃基,最 常用的就是十八烷基键合硅胶。 相。按键合有机硅烷的官能团分为极性键合相及非极 积等几何结构有关。 性键合相。 9 (2) 氧化铝 用氧化铝可分离萜类、生物碱类、脂肪类 及芳香族化合物,因制备方法和处理方法的差 别,氧化铝有弱碱性 (pH=9~10)、酸性 (pH=4~5)及中性(pH=7~7.5)之分,因此其使用 范围也有所不同。 它在薄层色谱法中的应用范围仅次于硅胶。 10 ①纤维素 按其用途不同分为普通纤维素 (天然纤维 素、高纯度纤维素、微晶纤维素) 、乙酰化纤 维素和离子交换纤维素。 ②另外还包括聚酰胺,葡聚糖凝胶 (亲水性葡聚 糖凝胶、亲脂性葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶离子 交换剂) 和硅藻土等固定相。 11 (3) 其他固定相 2、粘合剂及添加剂 (1) 粘合剂 理想的粘合剂要求亲水性好、粘结力强 且具有化学惰性。 常用粘合剂有:煅石膏(CaSO4) 、羧甲基 高聚物。 纤维素钠(CMC-Na) 、淀粉;预制板的粘合剂 包括有聚乙烯醇、聚丙烯醇或聚丙烯酰胺等 12 为了特殊需要可在制备薄层时加入某 些添加剂制备成具有特殊性能的薄层。包 括有荧光指示剂,酸、碱或缓冲液,硝酸 银溶液和其他。 带有荧光指示剂的薄层在紫外灯下整个薄 层呈现荧光,被分离化合物的斑点处的荧光被 猝灭而呈暗色。 (2) 添加剂 13 符号 含义 G 以石膏作粘合剂 H 无外加粘合剂 R 特别纯化的 P 制备用 W 水可湿性的 F 254,365 荧光指示剂激发波长 F254s 抗酸性荧光指示剂 40,60,…. 平均孔径 吸附剂及预制板包装上部分符号及含义 14 3、薄层板的制备方法 薄层板包括有预制板和手工制板两种。 (1) 预制板 预制板使用方便,涂布均匀,薄层光滑及有很 好的牢度,预制板有用玻璃板,塑料片或铝箔作为 载板,使薄层附着在上面,塑料片或铝箔的预制板 还有裁剪方便的优点。常用于薄层定量。 15 含粘合剂的硬板两种。 手工制板所用的玻璃板一般 为5cm×20cm,10cm×20cm或 20cm×

文档评论(0)

1亿VIP精品文档

相关文档