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- 2023-11-02 发布于上海
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重组创伤弧菌溶细胞素诱导THP-1细胞凋亡分子机制的初步研究的中期报告
本研究旨在探究重组创伤弧菌溶细胞素对THP-1细胞凋亡的分子机制。首先,我们通过外源性诱导法制备了不同浓度重组创伤弧菌溶细胞素(rVAC)处理的THP-1细胞,利用MTT法检测了rVAC处理后THP-1细胞的存活率变化,并在此基础上选择了有效的rVAC处理浓度,用以后续实验。
进一步对选定的rVAC处理浓度下的THP-1细胞进行分析,发现rVAC可以显著促进THP-1细胞的凋亡。通过AnnexinV-FITC/PI双染法检测,发现在rVAC处理下,THP-1细胞的凋亡率明显增加,提示rVAC可能通过影响凋亡途径促进THP-1细胞凋亡。于是我们进一步考察了rVAC对凋亡途径关键蛋白表达的影响。
Western Blot结果表明,rVAC处理后THP-1细胞中Bax表达上调,而Bcl-2表达下调,提示rVAC处理可能通过影响Bax/Bcl-2比例,促进线粒体途径的凋亡过程。同时,rVAC处理还可以下调c-IAP1和c-IAP2表达,提示其可能通过下调IAP家族蛋白的表达促进凋亡途径中的协同作用。
总的来看,本实验初步探究了重组创伤弧菌溶细胞素对THP-1细胞凋亡的分子机制,结果表明rVAC处理可以促进THP-1细胞的凋亡,可能通过影响Bax/Bcl-2比例和下调IAP家族蛋白表达的方式促进凋亡途径的协同作用。后续需
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