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- 2023-11-03 发布于上海
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融合多肽靶向DNA蛋白激酶自主磷酸化的放射增敏实验研究的中期报告
该实验旨在探索一种新型放射治疗策略,即利用多肽靶向DNA蛋白激酶(DNA-PK)自主磷酸化来增加肿瘤细胞对放射线的敏感性。为实现这一目标,我们合成了一种融合多肽(FKYCGG)和DNA-PK的蛋白,并对其进行了活性检测和放射增敏实验。
在活性检测方面,我们利用放射免疫沉淀实验证明融合蛋白可以结合到DNA-PK的活性部位,并能够启动其自主磷酸化过程。同时,在体外实验证明融合蛋白可以抑制DNA修复的过程,从而增加肿瘤细胞对放射线的敏感性。具体来说,与对照组相比,融合蛋白组在相同的放射线照射下,细胞的存活率更低,放射线的剂量增益比(Dose Enhancement Ratio,DER)也明显升高。
在放射增敏实验方面,我们利用人类肝癌细胞株(HepG2)作为模型,采用MTT法检测细胞的存活率。实验结果显示,融合蛋白组在放射线照射下的细胞存活率明显低于对照组,而且DER也随着放射线剂量的增加而逐渐升高。具体来说,当放射线剂量为2Gy时,融合蛋白组的DER为1.46,而当剂量增加至6Gy时,DER则升高至2.03。
综上所述,我们成功合成了一种融合多肽和DNA-PK的蛋白,并利用该蛋白实现了肿瘤细胞自主磷酸化和放射增敏。尽管仍需进一步优化和验证,但该策略有望成为一种新型的放射治疗手段,为肿瘤临床治疗提供一种创新思路和方法。
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