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无血清悬浮培养乳腺癌细胞系并对其干细胞亚群相关基因表达差异作初步研究的中期报告
本研究的目的是建立一种无血清悬浮培养乳腺癌细胞系的方法,并对其干细胞亚群相关基因表达差异进行初步研究。本报告为中期报告,主要介绍了研究的材料、方法和初步结果。
材料和方法:
本研究选用了乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和SUM159,采用无血清悬浮培养的方法进行培养,并比较其与传统有血清培养方法的生长情况。同时,利用流式细胞术对MCF-7、MDA-MB-231和SUM159中CD44+/CD24-、CD133+干细胞亚群进行分离,并对分离后的干细胞亚群和非干细胞亚群的基因表达差异进行比较分析。
初步结果:
1. 无血清悬浮培养方法可以有效地促进MCF-7、MDA-MB-231和SUM159的增殖,且无血清悬浮培养的细胞形态更为球形化与聚集;
2. 细胞采用无血清悬浮培养方法与采用传统有血清培养方法相比,MCF-7、MDA-MB-231和SUM159细胞系的增殖速率均有所提高;
3. 分离出的CD44+/CD24-、CD133+干细胞亚群的纯度较高;
4. 与非干细胞亚群比较,CD44+/CD24-、CD133+干细胞亚群的干细胞相关基因如OCT4、SOX2和NANOG表达相对较高。
结论:
本研究建立了一种无血清悬浮培养乳腺癌细胞系的方法,并对其干细胞亚群相关基因表达差异进行了初步研究。研究结果表明,无血清悬浮培养方法可以促进乳腺癌细胞系的增殖;分离出的CD44+/CD24-、CD133+干细胞亚群纯度较高;CD44+/CD24-、CD133+干细胞亚群具有较高的干细胞相关基因表达水平,这为后续深入研究乳腺癌干细胞提供了一定的基础。
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