金黄色葡萄球菌非编码RNA-L8以及TRAP蛋白生物学功能研究的中期报告.docxVIP

金黄色葡萄球菌非编码RNA-L8以及TRAP蛋白生物学功能研究的中期报告 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的致病菌，其引起的感染在医院和社区都非常普遍。非编码RNA（non-coding RNA, ncRNA）是一种不编码蛋白质的RNA分子，在细胞代谢调控中发挥重要作用。先前的研究表明，S. aureus存在大量的ncRNA，但对其中很多ncRNA的功能尚不清楚。本研究着重研究了一种名为L8的ncRNA，以及它和TRAP蛋白的相互作用对S. aureus的影响。 在实验中，我们首先通过定量RT-PCR验证了L8的存在，并通过Northern blot和原位杂交证明其与细胞生长周期和镰状杆菌型态的变化有关。然后，我们利用RNA蛋白共沉淀实验发现L8与TRAP蛋白有相互作用。TRAP蛋白是一种垂直基因开关蛋白，通过与tRNA结合，调控一些AA合成酶的表达。我们进一步探究发现，TRAP蛋白可以通过与L8结合，调控S. aureus的生长和代谢。 具体而言，L8的存在可以抑制TRAP蛋白对tRNA的结合，进而降低正常细胞生长所需的氨基酸合成。同时，我们发现L8的表达也被TRAP蛋白所调控。我们进一步利用DMAse I-footprinting实验考察了L8和TRAP蛋白结合部位的DNA保护区，发现其位于一个TRAP蛋白调控的面向AA合成酶的启动子上，暗示了L8和TRAP蛋白在调控AA代谢途径上的重要性。 综上，我们的研究发现了S. aureus中一种新的ncRNA-L8，并证明了其与TRAP蛋白之间的相互作用是调控S. aureus代谢的一个关键节点。我们的研究为揭示S. aureus的生物学机制奠定了基础，为探索防治院内感染提供了新的思路。