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黄酮类化合物提取分离研究进展 黄酮类化合物也被称为生物类黄酮，是一种衍生物或黄酮类化合物。黄酮类化合物是自然界以c6-c3-c6为基础的三级天然活性物质。化学结构中c3部分可用作脂链或与c6部分形成六元或五元环。黄酮类化合物是指通过中心三碳链连接的一系列化合物。 一般黄酮类化合物可根据母核基本结构的不同进行分类, 主要有黄酮醇、黄酮、黄烷酮、黄烷醇、花色素、异黄酮、二氢黄酮醇以及查尔酮等八类。另外, 还有一些其他类型的类黄酮, 如香豆素等。黄酮类化合物广泛存在于中草药、水果、蔬菜等绿色天然植物中, 是一类重要的天然有机化合物, 本文就黄酮类化合物的提取、分离、纯化及生物活性的研究进展作一综述。 1 黄酮类化合物的提取方法 黄酮类化合物因其结构和来源的不同, 溶解特性差异也很大, 应根据其极性和水溶性的大小来选择合适的溶剂进行提取。 1.1 乙醇提取法提取苷类化合物 这是目前国内外使用最广泛的方法, 很容易实现工业化生成。 其原理是利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同, 选用不同的溶剂萃取。常用的有机溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等, 一般采取乙醇为提取溶剂。高浓度的乙醇 (如90%～95%) 适于提取苷元, 浓度60%左右的乙醇适于提取苷类。提取次数一般为2～4次, 提取方法有热回流提取和冷浸提取两种方式。高金燕等以西芹作为测试样品, 使用无水乙醇为提取剂, 按西芹鲜重与提取剂的比例 (W/V) 1∶2, 在80℃下回流提取2～4h, 制备西芹总黄酮。 传统的热回流提取法具有成本低、安全性高、适合工业生产等优点。缺点是:①总黄酮提取率低。②温度过高导致部分黄酮类化合物分解。③由于提取溶剂中含水, 在加热状态下, 一些溶于水的杂质如糖类、蛋白质等一并进入提取液中, 加大了进一步分离的困难。 用石油醚、乙酸乙酯等极性较小的有机溶剂, 主要是提取黄酮苷元部分。虽然有机溶剂对黄酮的提取率较高, 而且冷浸提取也避免了黄酮类物质的受热分解, 然而还是存在一些缺点:①石油醚、乙酸乙酯等有机溶剂易燃易爆。②试剂有毒和具强烈刺激性, 危害人体、污染环境。③提取周期较长, 试剂成本较高。 1.2 热水提取 仅限于提取苷类。虽然设备简单, 但因提取杂质多、黄酮收率低, 故不常使用。 1.3 化合物类黄酮化合物 黄酮类成分大多具有酚羟基, 可用碱性水或碱性稀醇浸出, 浸出液经酸化后析出类黄酮化合物。需要注意的是, 应用此方法时, 所用碱的浓度不宜过高, 以免在强碱条件下加热破坏黄酮类化合物的母核。 1.4 系统溶剂的提取 用极性由小到大的溶剂依次提取, 可以提取出大多数游离的黄酮化合物, 但此法目前仅用于实验室, 很难工业化。 1.5 超滤法的提取 选用超滤法可以提高提取物的纯度, 并且在提取生产过程中, 可以减少废水排放, 避免臭水、污水产生, 环保且降低生产成本。 1.6 无有机溶剂残留污染法 双水相萃取技术 (ATPE) 分离原理是物质在双水相体系中的选择性分配。该法设备投资少, 操作简单, 无有机溶剂残留污染。由于天然植物中所含的化合物众多, 而双水相萃取技术具有较高的选择性和专一性, 因此利用这些技术有希望为从天然植物中提取有效药用成分开辟一条新的思路, 但目前研究不多。 1.7 利用酶抑制活性 酶解法对于一些黄酮类物质被细胞壁包围不易提取的原料比较实用。其原理是用相应的酶充分破坏以纤维素为主的细胞壁结构及其细胞间相连的果胶, 使植物中的果胶完全分解成小分子物质, 减少提取的传质阻力, 使植物中的黄酮类物质能充分释放出来。 1.8 分的特点方面分为3个月 此法是一种较新的方法, 具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。在较低温度下, 超声可以强化水浸提效率, 达到省时、高效、节能的目的。梁惠花等运用超声技术从油菜蜂花粉中提取黄酮类化合物, 可提高黄酮得率, 大大缩短提取时间。 1.9 微波萃取萃取mae 微波辅助萃取 (microwave-assisted extraction, MAE) 是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异, 使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热, 从而使被提取物质从基体或体系中分离, 进入介电常数较小、微波吸收能力相对较差的提取剂中。MAE技术是在传统有机溶剂萃取技术的基础上发展起来的一项新型萃取技术。微波辅助萃取法克服了传统传导加热时温度上升慢的缺点, 保证了能量的快速传导和充分利用, 微波加热过程实质上是介质分子获得微波能并转化为热能的过程。此法的主要优点是: (1) 可有效保护药材中的功能成分, 对提取物具有较高的选择性, 提取率高。②浸出过程中材料细粉不凝聚、不糊化。③提取速度快、省时、溶剂用量少。④安全、节能、设备简单、节省投资。 1.10 sfe萃取法 超临界流体萃取技