回阳生肌膏及其拆方对慢性皮肤溃疡大鼠il-8和nf-的影响.docxVIP

回阳生肌膏及其拆方对慢性皮肤溃疡大鼠il-8和nf-的影响 慢性皮肤溃疡通常由手术刀、意外伤口、伤口、辐射损伤、下肢动脉供血不足和下肢静脉等疾病引起。这是中医外科常见病和常见疾病。由于其长期治疗，它形成了一种难治性和难治性溃疡，严重影响了患者的生活质量。这是临床上难以治疗的疾病之一，也是临床伤口修复的难题。中药在促进创面愈合方面具有明显的优势,回阳生肌膏是首都医科大学附属北京中医医院赵炳南、王玉章等已故名老中医创立的院内制剂,用于治疗慢性皮肤溃疡,证属“阴疮”者,临床应用数十年,疗效显著。前期实验研究结果显示回阳生肌膏有较好的抗菌、消炎及促进创面愈合的作用。为了进一步研究其促进创面愈合的机制,完善“阳生阴长”理论,本实验将分别观察回阳生肌膏全方及其不同拆方对慢性皮肤溃疡大鼠创面愈合的影响。 1 材料表面 1.1 我国北京维通利华实验动物 SD大鼠48只,体重(200±20)g,SPF级,雄性,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2006-0009。饲养于SPF动物房内,温度(22±2)℃,相对湿度40%~60%,12 h光照。 1.2 回阳生肌散、温阳保鲜方散、配合物的组成 回阳生肌散、回阳生肌温阳益气拆方散、回阳生肌活血生肌拆方散、黄凡士林,均由首都医科大学附属北京中医医院制剂中心制备。回阳生肌散由肉桂、炮姜、人参、黄芪、川芎、当归、白芥子、白蔹组成;温阳益气拆方散由肉桂、炮姜、人参、黄芪、白芥子组成;活血生肌拆方散由川芎、当归、白蔹组成。将各组方散与黄凡士林(以1∶4比例)调成膏剂,均匀涂抹在纱布上制成药膏纱条,模型组纱条上只涂抹黄凡士林,每平方厘米含药膏0.667 g。 1.3 病毒 ATCC25923金黄色葡萄球菌液(3~5×1011L-1),由北京中医药大学基础医学院医学病原学系免疫教研室馈赠。 1.4 tnf-酶联免疫试验剂 白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)酶联免疫试剂盒,购自天津市灏洋生物制品科技有限责任公司。氢化可的松注射液(浓度5 g/L),购自天津金耀氨基酸有限公司。 2 方法 2.1 模型的制作和给药 44只大鼠,适应性喂养3 d后随机分为4组:模型组、回阳生肌膏全方组(以下简称全方组)、回阳生肌膏温阳益气拆方组(以下简称温阳益气组)、回阳生肌膏活血生肌拆方组(以下简称活血生肌组),每组11只。实验前1 d用脱毛膏(10%Na2S)将大鼠背部脱毛,面积4 cm×4 cm。次日将大鼠用4%水合氯醛(10 m L/kg)腹腔注射麻醉后,在脱毛区用3 cm×3 cm的塑料框架蘸龙胆紫标记造模面积,在无菌条件下剪去造模区皮肤,深达筋膜,并在筋膜下喷洒金黄色葡萄球菌(5 m L/kg),三层医用纱布覆盖创面,用橡皮膏包扎固定,随后每只大鼠股肌注射氢化可的松(4 m L/kg)。观测各组体重、溃疡面积无差异后开始给药,模型组给予黄凡士林纱条,各给药组给予相应药膏纱条,根据创面愈合情况剪取相应大小纱条贴敷于创面上,用医用纱布和橡皮膏固定,每日1次。于给药3 d和给药7 d分别从每组随机选4只大鼠,腹主动脉取血用于指标检测。 2.2 观测指标 2.2.1 观察一般情况 每日观察造模后大鼠一般情况,记录每日体重变化情况。 2.2.2 伤口愈合 记录每日创面愈合面积,计算创面愈合率。 创面愈合率=(给药前创面面积-未愈合创面面积)/给药前创面面积×100% 2.2.3 酶检测 于给药3 d和给药7 d后,分批将大鼠麻醉(4%水合氯醛),腹主动脉取血,静置30 min后离心(1 500 r/min,15 min),吸取上清液分装于EP管,参照试剂盒说明书方法,酶标仪测定492 nm处测定IL-8、TNF-α的OD值。 2.3 数据统计分析 使用SPSS 17.0软件对实验数据进行统计,数据用均数±标准差(x珋±s)表示。符合正态分布的数据采用One-Way ANOVA分析,方差齐的数据两两比较采用LSD检验,方差不齐的数据两两比较采用t检验;不符合正态分布的数据采用Kruskal-Wallis H分析,两两比较采用Mann-Whitney检验,以α﹦0.05作为检验标准。 3 结果 3.1 大鼠皮肤长期健康 造模期间温阳益气组和活血生肌组各有1只大鼠死亡,之后不再有死亡。造模后各组大鼠食少、便溏、体重下降,尾冷、蜷卧、活动减少,创面分泌物有腥臭味。2 d后分泌物逐渐清稀、减少。用药时,创面颜色晦暗,肉芽组织较少,创周板滞僵硬。 3.2 全方组和温阳犯罪比较 造模5 d各组创面面积之间没有差异开始给药。给药2 d,活血生肌组、温阳益气组与模型组和全方组比较均有差异(P0.05),各给药组之间没有差异。给药4 d,全方组创面愈合率大于其他3组,且均有显著性差异(P0.05)。其