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鸡血浆淀粉酶的多态性及其在外来种中的分布 许多国内外学者对鸡血浆淀粉酶（amy）的多样性进行了研究报道。这些研究报道,已从不同程度上阐明了鸡血浆淀粉酶的遗传方式,揭示出不同的鸡种具有不同的血浆淀粉酶多态性特点,并表明血浆淀粉酶多态性与鸡的经济性状和生活力性状之间存在着一定的关系。贵州地方鸡种资源丰富,但迄今我们对于贵州地方鸡品种的认识还仅限于体型外貌及一般生产性能的描述。因此,为深入认识和评价贵州地方鸡种资源,进一步搞好对贵州省地方鸡品种的保存、选育和开发利用积累提供依据起见,我们采用水平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,并通过与河南、广东、江西等有关鸡种及外来引入鸡种相对比较的方式,对贵州部分地方鸡品种血液酶的多态性进行了检测研究,本文主要报道有关血浆淀粉酶的多态性检测结果。 1 材料和方法 1.1 研究鸡场 试验共检测和分析鸡种13个。这些鸡种及其样品来源和数量(只)是:固始鸡(河南省固始县,118)、郑州红鸡(河南省正阳县郑州红鸡饲养场,110)、乌蒙鸡(贵州省毕节市郊区农户,31)、黄羽乌蒙乌骨鸡(贵州省毕节地区牧科所科研鸡场,42)、黑羽乌蒙乌骨鸡(贵州省毕节地区牧科所科研鸡场,37)、泰和鸡(贵州省毕节地区牧科所科研鸡场,20)、小香乌骨鸡(贵州省畜牧兽医科研所科研鸡场,80)、艾维茵肉鸡(贵州畜牧技术开发公司种鸡场,46)、伊利莎蛋鸡(贵州畜牧技术开发公司种鸡场,46);封开杏花鸡、惠阳胡须鸡、清远麻鸡及白洛克鸡这4个鸡种是直接引用殷雅明等和张细权等的资料。 1.2 血样、血浆的采集 被测鸡种的血样均于清晨饲喂前采集。每鸡从翅下静脉采血1.2 ml,以EDTA钠抗凝。血样采集后,立即用离心机以1 000 rpm离心分离出血浆,置低温带回备用。所有参试鸡只的血样均从成年、健康、无病、发育正常的鸡群中采集。 1.3 电泳方法和凝胶染色 按吴显华、张细权等的方法进行。 1.4 浆淀粉酶-2的生物酶学检测 有关血浆淀粉酶-1(Amy-1)的判型参照铃木正三的标准图谱进行,血浆淀粉酶-2(Amy-2)的判型按肖朝武等的方法进行。根据电泳图谱及文献关于Amy-1及Amy-2的多态性遗传方式,计算基因型频率和基因频率。对Amy-1多态分布的遗传平衡情况,用χ2适合性测验法进行检验。 2 结果与分析 2.1 无带-+类型 由各参试鸡只在Amy-1区域观察到有两条区带,即A带和B带(图示)。由它们组合出3种类型:AA、AB和BB。这3种类型是受常染色体上Amy-1位点的一对等显性等位基因Amy-1A和Amy-1B的控制。在Amy-2区域,在少数鸡种的部分个体上,表现为有带(+)类型,而多数则为无带(-)类型。有带和无带受Amy-2位点上一对显隐性等位基因Amy-2I和Amy-2i的支配。 2.2 外鸡属型的筛选结果 各鸡种Amy-1位点的基因频率及基因型频率详见表。经χ2检验表明,除泰和鸡外,各鸡种在Amy-1位点均显示以杂合子AB型的频率显著高于纯合子AA型和BB型的频率。贵州小香乌骨鸡则只有AB型,没有AA型和BB型。惠阳胡须鸡、艾维茵肉鸡、伊利莎蛋鸡和白洛克鸡则没有发现AA型。表明这些鸡种在Amy-1位点上极显著地偏离了Hardy-Weinberg平衡比例,呈现出杂合子显著性优势现象。 对比各鸡种中Amy-1位点上两个等位基因的基因频率的大小,可见大致有3类情况:第1类是固始鸡和泰和鸡,显示Amy-1A的频率高于Amy-1B的频率;第2类是惠阳胡须鸡以及艾维茵、伊利莎和白洛克这3个外来鸡种,以Amy-1B的频率高于Amy-1A的频率;第3类为其余的郑州红鸡、乌蒙鸡、黄羽乌蒙乌骨鸡、黑羽乌蒙乌骨鸡、小香乌骨鸡、封开杏花鸡、清远麻鸡,呈现Amy-1A的频率与Amy-1B的频率大致接近或相等。 2.3 带+类型频率不稳定 在Amy-2位点,仅在黄羽乌蒙乌骨鸡、小香乌骨鸡、封开杏花鸡、清远麻鸡这4个鸡种中表现有带(+)和无带(-)两种类型,但以无带(-)类型为主(其频率介于0.9750～0.9815),而有带(+)类型的频率则很低(介于0.0185～0.0250)。其余鸡种中均表现为无带(-)类型(频率达1.000),没有发现有带(+)类型(其频率为0.0000)。 3 讨论 3.1 关于血浆淀粉酶多态性的认识 鸡的α-淀粉酶是在胰腺和血液中发现的,其功能与体内糖原、淀粉以及淀粉残基多糖的水解有关。迄今在家鸡中已发现了3种多态性淀粉酶。张细权等认为,胰腺的淀粉酶与血浆淀粉酶Amy-1属同一种酶。肖朝武、吴显华也证明,血浆、胰腺、十二指肠和唾液具有相同的淀粉酶型。因此,家鸡的淀粉酶基因型可以从血液中测定。 对血液淀粉酶多态性研究得最多的是Amy-1。1970年,Hashiguchi等采用琼脂糖凝胶电泳法,首先发现血浆淀粉酶的多态性。他们发现