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HIV-1Vpr与干扰素诱导蛋白IFP35间的相互作用初探的中期报告
本研究旨在探讨HIV-1病毒蛋白Vpr与干扰素诱导蛋白IFP35间的相互作用。通过基因克隆和蛋白表达纯化技术,成功制备出了HIV-1Vpr和IFP35的重组蛋白。并且通过葡萄糖阻断实验成功阻断了IFP35的干扰素诱导功能,从而用于后续实验。
接着,进行了体外蛋白相互作用实验,结果表明HIV-1Vpr与IFP35蛋白可以相互作用。通过GST pull-down实验和共免疫沉淀实验进一步验证了它们之间的相互作用。并且,通过蛋白荧光共振能量转移技术,初步揭示出了它们之间的空间结构和相互作用模式。
此外,还进行了细胞实验。通过共转染HIV-1Vpr和IFP35蛋白的质粒,观察到它们能够合作抑制干扰素信号通路相关的基因转录。经过Western blotting检测,发现共转染能够显著降低STAT1、STAT2和IRF9的磷酸化水平,从而抑制干扰素JAK/STAT信号通路。这些结果表明,HIV-1Vpr和IFP35在干扰素调节中具有调控作用。
总的来说,本研究初步揭示了HIV-1Vpr与IFP35之间的相互作用模式,在探索HIV-1感染机制和干扰素调节实践应用方面具有重要意义。
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