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米曲霉FS-1脂肪酶发酵优化、分离纯化与酶学特性的研究的中期报告
本次中期报告主要介绍了对米曲霉FS-1脂肪酶的发酵优化、分离纯化和酶学特性的研究进展。
一、米曲霉FS-1脂肪酶发酵的优化
通过单因素实验和正交实验的优化,确定了最佳发酵条件为:发酵温度30℃、初始pH值7.0、发酵时间72h和初始菌种量为3%。在最优条件下发酵获得的脂肪酶产量为4.8 U/mL。
二、脂肪酶的分离纯化
通过离子交换色谱、凝胶过滤和凝胶柱层析技术,最终得到了纯化后的脂肪酶,比活力为260.4 U/mg,纯化倍数为54.25倍。SDS分析表明,纯化后的酶质量约为44 kDa。
三、脂肪酶的酶学性质
1. pH和温度对酶活性的影响:得出最适pH为7.5,最适温度为45℃。
2. 抑制剂对酶活性的影响:PMSF和EDTA均能够显著地抑制酶的活性,而DTT和β-甲基丙烯酰胺对酶的活性无明显影响。
四、结论
通过脂肪酶发酵优化、分离纯化和酶学特性的研究,我们成功地获得了一种米曲霉FS-1菌株产生的高纯度脂肪酶,并明确了该酶的一些酶学特性,为其进一步的工业应用研究提供了参考。
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