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YOCON细胞培养基生产工艺 本文档共101页；当前第61页；编辑于星期二\5点21分 细胞培养基产品在流感病毒分离上的应用 流感病毒分离所需培养基及试剂 DMEM(高糖，含L-谷氨酰胺，不含丙酮酸钠） 胎牛血清 0.05%胰酶+0.02%EDTA 青链霉素（10000u/ml，10000ug/ml） 庆大霉素（50mg/ml） Hepes（1M） BSA(v) 7.5% TPCK-胰酶（2mg/ml） HBSS 本文档共101页；当前第62页；编辑于星期二\5点21分 相关试剂用量 本文档共101页；当前第63页；编辑于星期二\5点21分 病毒CPE反应 本文档共101页；当前第64页；编辑于星期二\5点21分 病毒液的收获 当75%～100%细胞出现病变时进行收获，收获之前可以将细胞放于-70℃冰箱，冻融1～2次，以提高收获标本的病毒滴度。即使无细胞病变也应该于接种后第7天收获。收获病毒液时，先温和摇动细胞瓶数次，然后用10mL的无菌移液管吸取病毒液置于15mL无菌离心管中，混匀病毒。 收获的病毒液可以进行红细胞凝集实验，如没有红细胞凝集现象，应将收获病毒培养液再MDCK细胞传代2-3次。 如果有必要，可再通过血凝抑制实验鉴定分离物，并将分离物保存在-70℃或-70℃以下。 本文档共101页；当前第65页；编辑于星期二\5点21分 质控及检测能