劳森氏胞内菌的PCR检测方法及其抗体间接ELISA检测方法的建立与应用的中期报告.docxVIP

劳森氏胞内菌的PCR检测方法及其抗体间接ELISA检测方法的建立与应用的中期报告 本文所述的中期报告提供了有关劳森氏胞内菌PCR检测方法和间接ELISA检测方法的建立和应用的信息。 PCR检测方法的建立： 从猪的胆汁和肝脏组织样本中提取基因组DNA，并利用劳森氏菌16S rRNA基因和16S-23S rDNA间隔区域（ISR）为靶标，设计PCR引物。通过优化PCR反应体系和条件，建立了一种高效、特异、可重复的PCR检测方法来检测劳森氏菌。 间接ELISA检测方法的建立： 利用劳森氏菌外膜蛋白（OMP）作为抗原，生产了其兔抗血清，并建立了间接ELISA检测方法。通过优化实验条件，建立了一种高灵敏度、高特异性、稳定性好、重现性高的检测方法，可用于检测劳森氏菌血清中的特异性抗体和肉汁中的O抗原。 应用： 利用PCR检测方法和间接ELISA检测方法，对不同来源的劳森氏菌样本进行了检测分析。结果表明，PCR检测方法的检测限为10 CFU/mL，检测结果与传统的菌落计数方法一致。间接ELISA检测方法能够检测到饲料样品中的劳森氏菌O抗原，具有较高的灵敏度和特异性，检测结果稳定、重复性好，可用于大规模的检测应用。