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《法医学中的酶型》PPT课件 法医学中的酶型是指某个个体所特有的酶谱,是基因表达反映的体现,也是刑事案件中重要的检材之一。 什么是酶型? 定义 酶型:指同样基因座的酶表型的综合体现。其特点是每种酶型都是由多种酶基因所决定的。 形成 酶型是由基因所控制的,基因突变导致酶型变异。每个人的酶型都是独特的,具有个体独特性。 意义 酶型是构成人体基因型的重要组成部分,其中丙氨酸氨基转移酶和酸性磷酸酶被广泛应用于刑事案件中,具有重要意义。 酶型在法医学中的应用 刑事案件 酶型检测可用于人身、生命损伤、交通事故、性侵等案件的犯罪嫌疑人的指认、鉴定。 血统鉴定 酶型检测可以用于亲子关系鉴定、家族血统关系鉴定等方面,是确定远古人类的亲缘关系的有力手段。 排除误判 通过酶型检测,可以大大降低因某些误判因素导致排除的概率,提高检测的准确性。 酶型的分类 1 转移酶 分为三种型:A、B、O型。其中,A和B的基因都是共显性,O型是隐性。 2 氧化酶 分为多酚氧化酶、淀粉酶、乳酸脱氢酶、酯酶、组胺酶等多种类型。 3 磷酸酶 包括酸性磷酸酶和碱性磷酸酶两种基本类型。 4 糖酸酶 主要分为两类:α-半乳糖苷酶(Aga)和乳糖酶(Lac)。 酶型检测的方法 电泳法 可以逐一测定各酶单一分子的酶活。 对的酶形式、酶活度的测定精确。 能够同时检测数目不等的多种酶。 免疫电泳法 利用抗体特异性反应和落体净测定原理,检查样品中某些特定的酶谱。 使用方便快速。 仪器较为简单。 系统酶学法 利用测定实验室动物、人群等多种酶的系统酶谱并统计分析其出现频率,以推断出实验样品酶学型的方法。 可不受所检测物的影响。 消耗时间长。 酶型图谱的绘制方法 1 步骤1:Collect Samples 收集样本,提取基因组DNA并纯化。 2 步骤2:Test Samples 通过电泳等方法检测样品中物种类别和数量,确定出特定酶谱。 3 步骤3:Measure Distance 用迁移距离(或质量)来度量电泳分离的同alleles之间的距离。 4 步骤4:Plot Data 以迁移距离为横轴、酶型的出现频次为纵轴,曲线说明不同酶型的分布情况。 酶型检测在毒物检测中的应用 案例1:氟化物中毒案 发现死者与密室内曾经发生过争斗,死者遗骸上没有明显痕迹。通过检测唾液、血液等样本中丙氨酸氨基转移酶的酶学图谱,鉴定了毒物中的氟化物。 案例2:毒鱼中毒案 分析鱼内致毒物质的成分后,通过检测死者丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶等酶谱的变化,发现其中很多深海鳐中含有致毒量的出汁氨基酸TMAO。 酶型检测在血型鉴定中的应用 A、B血型鉴定 通过检测转移酶中A型酶、B型酶的分布情况,可以鉴别出A型、B型、AB型、O型几种血型。 亲子关系鉴定 通过检测甘油醛-3-磷酸脱氢酶等酶谱,将孩子和父亲酶型相同的一段区间作比较,判断两者之间亲子关系。 个体识别 通过检测乳糖酶、酯酶等酶谱,可以把人体的基本信息(组织分类、年龄、性别等)记录在酶型图谱中,为个体防范和鉴定提供技术支持。 酶型检测的误差与排除 1 误差来源1:环境因素 如茶、咖啡、酒精等,含有的酚类和香醛可影响诱导期的形成,导致检测结果不准确。 2 误差来源2:检测工艺 实验室操作者的技术熟练程度会直接影响检测结果的准确性,包括样本提取、电泳等操作步骤。 3 误差排除方法1:对照试验 将纯种样本作为对照,保证电泳分离仪的正常工作,及时排除环境因素的干扰。 4 误差排除方法2:错误排除 对弱、强带出现次数进行统计分析,若结果合理,则能有效准确地排除电泳工艺上出现的误差。 酶型技术的前景及发展趋势 多样化应用 酶型技术在检验领域逐渐得到了更广泛的应用,被用于血型鉴定、毒物检测、遗传疾病筛查等方面。 在人群的基因组和表达谱方面提供大量新的信息。 为慢性流行性疾病、癌症等方面的防治提供了新的方法。 技术升级 现代分子生物学、应用数学、计算机辅助等技术的应用,使酶型技术日益成熟,并将继续在理论、方法方面得到创新、更新和优化。 大数据/big data的应用。 新一代测序等技术的引入。 * * * * * * * * * * * * * * * * *
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