视网膜神经节细胞的荧光金逆行示踪研究.docxVIP

视网膜神经节细胞的荧光金逆行示踪研究 视力损伤后的视网膜神经节（rg）的精确计数是评估损伤程度的重要指标。不同的种属,其视觉投射是不同的,大鼠或小鼠大多数的RGCs是投射到上丘(superior colliculus,SC),大约30%的RGCs投射到外侧膝状体(lateral geniculate nucleus,LGN)。由于RGCs在视网膜细胞中是唯一能通过其轴突经过视神经和视束投射到中脑的靶核团(上丘和外侧膝状体)的一类细胞。本实验利用逆行轴浆运输的原理将荧光金(fluorogold,FG)注射到Long Evans 大鼠RGCs的靶核团对RGCs进行标记,检测视神经损伤后RGCs数目的改变,进而为评价视神经损伤后视网膜节细胞存活率提供一种可靠的方法。 1 材料和方法 1.1 血管密度的测定 FG:美国Biotium公司;多聚甲醛:重庆化学器材厂;速眠新:吉林农牧大学兽医研究所。大号无创血管夹:无锡医用器械厂;大鼠立体定位仪:日本NARISHIGE;荧光显微镜:德国Leica公司。成年Long Evans大鼠20只,雌雄不限,体重(270±20) g,由第三军医大学野战外伤研究所动物中心提供。按对照组、损伤后7 d、14 d、21 d分为4组,每组5只大鼠。 1.2 方法 1.2.1 gma点的定位 速眠新肌肉注射(1.0 mL·kg-1),麻醉成功后,固定在大鼠立体定位