干细胞体内近红外二区示踪成像操作规程.pdfVIP

干细胞体内近红外二区示踪成像操作规程 1 范围 本文件确立了干细胞体内近红外二区示踪成像的操作程序，规定了操作中使用的试剂材料与仪器设 备，干细胞体内近红外二区示踪成像操作程序的构成，以及各步骤的操作指示和各步骤之间的转换条件， 描述了干细胞体内近红外二区示踪成像的追溯方法。 本文件适用于干细胞小鼠体内近红外二区示踪成像试验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 19489—2008 实验室 生物安全通用要求 HJ 421 医疗废物专用包装袋、容器和警示标志标准 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 符号和缩略语 下列符号和缩略语适用于本文件。 CAS：美国化学文摘服务社（Chemical Abstracts Service） CCK-8：细胞试剂（Cell Counting Kit-8） DAPI：4,6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole) FLI：荧光成像（fluorescence imaging） FBS：胎牛血清（fetal calf serum） PBS：磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffered saline） PbS：硫化铅（lead sulfide） Rnase—A：核糖核酸酶 A(Ribonuclease A) Sulfo—SMCC ：4- (N- 马来酰亚胺甲基) 环己烷-1- 羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 （4- (N-Maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt） α-MEM：α最低必须培养基（alpha minimal essential medium） 5 试剂材料与仪器设备 1 5.1 试剂材料 5.1.1 除非另有说明，本试验所有试剂应符合制造商认证的细胞培养等级。其他试剂应选尽可能高的 纯度。 5.1.2 本试验所用的水应为电阻率大于5 M Ω•cm 的纯水。其他试剂材料应符合表1 的要求。 表1 试剂材料清单 序号 试剂材料名称 用途 浓度配比 要求 调配方法 1 Ⅱ型胶原酶 细胞培养 0.03 g/ml CAS No:9001-12-1 1000 mg/L D-葡萄糖， 292 mg/L L-谷氨酰胺， 2 α—MEM 培养基 细胞培养 / 110 mg/L 丙酮酸钠， 2200 mg/L 碳酸氢钠， pH 值7.0～7.4 3 胎牛血清 细胞培养 0.02 g/ml 4 青霉素（PNC ） 细胞培养 100 U/ml 5 链霉素（SM） 细胞培养 100