UV-Vis 分光光度分析法.pptVIP

* 高斯曲线模拟一个吸收峰，如右图 零阶光谱的极大在奇数阶导数中相应于零，在偶数阶导数中相应于极值。有助于吸收曲线峰值的精确确定。 零阶光谱的拐点在奇数阶导数中产生极值，在偶数阶导数中为零值。利于肩峰的鉴别和分离。 导数阶增加，极值数目增加（导数阶数+1）。谱带宽度变小，分辨力增高，可分离和检测重叠的谱带。 （1）导数光谱的波形和特点 50-* * 保持入射光强度 I0 在测定波长范围内恒定，则据L-B定律，吸光度A 对波长λ的导数： 各阶导数信号与浓度成正比。定量依据 曲线斜率越大，灵敏度越高 导数阶数越增加，峰形越尖锐，分辨率越高 （2）导数光谱定量原理 50-* * 将干扰组分的干扰吸收表达为一个幂函数： 干扰背景随求导阶次的增加而逐步降幂 n阶导数后，干扰组分的n阶导数值为一常数，说明：导数光谱法可有效消除共存组分的干扰吸收 （3）导数光谱法对干扰吸收的消除 求一阶导数后： 求n阶导数后： 50-* （4）导数测量的方法 * 50-* 正切法 峰谷法 峰零法 选择性、灵敏度均提高，可痕量分析 定性优势：利用信号更多、更明显，易于辨认。 定量优势：能消除背景干扰、可分离重叠谱带 注意事项：导数光谱变异很灵敏，导数光谱上的数值与浓度比值无通用常数。故需采取标准对比法。 导数光谱的特点 * 50-* * 4、褶合光谱法 convolution spectrometry 褶合光谱法：以正交函数为基础的一种信号分析方法。可使信号所包含的重要特征显现出来。 褶合曲线分析：采用褶合的数学模型将吸收曲线转换成褶合曲线群，扩大不同组分对光吸收的差异性和吸收曲线的细微变化，减少各组分间的数学相关性，为定性和混合物定量提供了更多可利用信息。 褶合变换（Convolution Transform，CT）被称为数学显微镜 新的信号处理技术 50-* * （1）褶合光谱的基本原理和主要特点 特点： 信息量大： 一条吸收光谱通过褶合变换可获得成百上千条褶合光谱，形成独立的光谱体系。 同时包容导数光谱法和正交函数法，具二者的优点和理论基础，实用价值更广泛。 提高了信噪比和分辨率，显露更多细微信息和变化。 基本原理: 50-* * （2）褶合光谱的定性技术： 经褶合变换不同物质的差异会在高分辨区域得到反映。 为克服虚假信号，常以对照品褶合光谱的标准区域作为定性鉴别的依据。 （3）褶合光谱的定量技术： 单组分：对含有背景吸收的样品直接分析 多组分：以褶合光谱为基础，结合最小二乘法求解。因减少组分间的数学相关性，通过异步分析和交互校正技术，可筛选出最佳结果。 50-* * （4）褶合光谱的适用条件和范围 褶合光谱分析法的两个适用条件： 线 性：信号与待测物质的浓度成正比； 加和性：混合物分析信号等于所含各组分信号之和。 凡符合此两条的任何分析信号均可用褶合光谱分析技术进行分析信号的处理： 紫外可见光谱，红外、近红外光谱分析 荧光光谱分析，核磁共振波谱分析 色谱分析 50-* * UV-Vis 分光光度分析法 一、分析条件的选择 二、定性鉴别 三、纯度检查 四、定量分析 五、结构分析 50-* * 一、分析条件的选择 意义：获得可靠分析数据的前提和保证！ 目的：方法最优化，高灵敏度和准确度。 包括：三方面 样品处理条件 参比选择条件 仪器测试条件 50-* * 1、样品处理条件的选择 （1）样品溶剂的选择 避免产生溶剂干扰，了解溶剂的UV截止波长 涉及光谱的精细结构，需考虑溶剂的极性 水 200 环己烷 200 正己烷 220 96%硫酸 210 乙醚 210 甲醇 205 乙醇 215 正丁醇 210 异丙醇 210 甘油 230 二氯甲烷 235 四氯化碳 245 氯仿 245 苯 260 甲苯 285 丙酮 330 二硫化碳 385 乙酸乙酯 260 50-* * 1、样品处理条件的选择 （2）测试样品的性状 溶液浓度：保证吸光度范围适宜 样品纯度： 溶液酸碱性： 溶质粒径：真溶液，混浊液，乳浊液 样品浓度偏离较大 A值不在理想范围 50-* * A值偏离较大时分析策略：示差分光光度法 测量原理：以一浓度略大或略小于待测试样组分浓度的溶液作参比溶液，测得的吸光度实际为二者之差ΔA： 适用情况：试样中组份的吸光度A值很高或很低时，克服其较大的相对误差。 示差目的：使吸光度值读数处于正常范围 50-* * 常用方法： 高浓度测定法