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肠球菌 不要报告肠球菌，除非达到90%纯培养 很多革兰阳性球菌都是呼吸道正常菌群 本文档共43页；当前第31页；编辑于星期日\7点20分 下呼吸道细菌学检验操作规范讨论稿 本文档共43页；当前第1页；编辑于星期日\7点20分 本文档共43页；当前第2页；编辑于星期日\7点20分 分析前下呼吸道标本检验 标本采集 咳痰 诱导痰（高渗盐水诱导3%NaCl 20-30ml） 本文档共43页；当前第3页；编辑于星期日\7点20分 气管和内镜吸出物 （气管插管24h，就有定植菌，仅有临床症状时，否则切勿培养气管吸出物） 气管镜标本 （由肺科医生或受训后医生采集）支气管肺泡灌洗液（BAL）支气管灌洗液，保护性毛刷标本（PSB），支气管穿刺活检标本 支气管灌洗液-BAL-PSB-穿刺活检标本 本文档共43页；当前第4页；编辑于星期日\7点20分 标本运送 无菌杯 条码 1－2h内送检 超时，苛养菌如肺炎链球菌减少，口咽部正常菌群将过度生长 本文档共43页；当前第5页；编辑于星期日\7点20分 标本拒收规则 不接受48h内重复送检培养的标本 拒收以下标本申请做下呼吸道感染诊断： 24h内采集的痰标本 口水 诱导痰 鼻冲洗液和分泌物或鼻孔拭子 标本延迟2h且未冷藏，应报告中注明标本延误送检，可能对培养结果造成影响 咽部标本 厌氧培养标本 支气管刷培养，只能用保护性毛刷 支气管灌洗液，气道分泌物。 本文档共43页；当前第6页；编辑于星期日\7点20分 污染痰标本和气管内标本革兰染色拒收条件的评价（痰涂片 20－40/LP；气管吸出物低倍镜和油镜下都要检测） 不合格标本有： 痰标本 = 10个上皮细胞/低倍视野 但如果WBC数是上皮细胞数的10倍，单一形态的细菌量达到3+至4+，可接受标本进行培养 成年人支气管吸出物：10SECs/LPF或未见细菌 患儿支气管吸出物：未见细菌 如WBC 4+，并可见纤维细胞，但未见细菌，最好重新涂片做吖啶橙染色，用荧光显微镜观察弹性纤维上是否有细菌，假单胞菌和嗜血杆菌可能会在这类涂片中漏检； 还可以见军团菌，此类感染中常缺少白细胞。 本文档共43页；当前第7页；编辑于星期日\7点20分 门诊接受到大量脓性标本，应立即接种，不必等待涂片结果。 拒收培养标本报告方式： “涂片所见：每低倍镜视野含＝10个扁平上皮细胞，提示标本质量差，不做培养；如果有临床指征请重新采集标本” “涂片检查40个视野，未见细菌，不做培养；如果临床指征请与实验室联系” 不能拒收标本 送检军团菌培养、抗酸染色痰标本、气管吸出物和来自囊性纤维化患者的痰标本 本文档共43页；当前第8页；编辑于星期日\7点20分 分析中下呼吸道标本检验 接种 II级生物安全柜内进行 尽快处理 挑取最脓或血色最浅标本 支气管镜标本，做细菌定量培养的BAL和或PSB标本切勿离心。 涂片，革兰染色 本文档共43页；当前第9页；编辑于星期日\7点20分 标本接种 血平板、巧克力平板和麦康凯（或中国蓝/伊红美兰） 以下步骤可选择一项或多项： 在接种后的巧克力平板上贴杆菌肽纸片（10IU），用于抑制上呼吸道微生物菌群，提高流血嗜血杆菌检出率 用金葡ATCC25923点种接种后的血平板，便于直接观察嗜血杆菌的卫星现象 血平板的第二个1/4区贴奥普托辛(OP)纸片，可在原始平板上直接检测抑制肺炎链球菌的生长。不推荐常规使用，如有大量社区感染肺炎患者标本时可考虑使用 本文档共43页；当前第10页；编辑于星期日\7点20分 培养 35－37℃、5%CO2条件培养48h，最好至72h； 侵入性方法采集的肺标本，培养延长至4天 本文档共43页；当前第11页；编辑于星期日\7点20分 直接试验 革兰染色 注明细胞、细菌量以及评价结果 见表3 胆汁溶菌试验 革兰阳性双球菌 本文档共43页；当前第12页；编辑于星期日\7点20分 表3 痰涂片革兰染色结果解释 指征 解释 每个低倍镜视野发现10个鳞状上皮细胞 标本含有唾液和上呼吸道分泌物，报告“10个扁平上皮细胞/低倍视野，提示标本被唾液污染，将不再进行培养” 每低倍镜视野发现10个扁平上皮细胞，大量多形核白细胞，存在肺泡巨噬细胞和柱状上皮细胞 提示是一个良好的深部痰标本 大量多形核白细胞 胞内细菌 弹性蛋白或胶原纤维 提示感染 Curschmann’s螺旋纤维 提示感染 淀粉样小体 坏死白细胞 提示感染 粉色絮状物 提示呼吸道疾病治疗产生的雾状高渗水 Charcot-Leyden结晶 提示过敏性肺曲霉病 大量多形核白细胞，主要见革兰阳性球菌成对或成短链排列 可疑肺炎链球菌。电话通知临床医生 本文档共43页；当前第13页；编辑于星期日\7点20分 指征 解释 大量多形