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双报告基因的研究进展 1 p33基因损伤后细胞凋亡 通常，生物体内的p53蛋白水平维持在相对较低的水平。当细胞出现dna损伤和低氧刺激时，p53蛋白将以三种方式对dna损伤进行反应，激活p11基因的表达将导致细胞周期延迟，激活dna恢复相应基因的表达。然而，如果损伤太多，p53基因将激活复制基因的表达，诱导细胞的死亡。因此, p53蛋白的表达水平和转录活性的提高, 是细胞出现DNA损伤的一种重要表现形式。在此理论基础上, 可以构建由p53或p53靶基因的启动子驱动的荧光虫荧光素酶表达载体, 辅以海肾荧光素酶报告基因载体 (如p RL-CMV) 作为内参质粒转染到细胞中, 观察具有遗传毒性的化学物质对荧光素酶报告基因表达的诱导性, 从而检测化学物质遗传毒性。 2 nf-kb信号通路 双荧光素酶报告基因系统常被运用于研究p53信号通路及NF-k B信号通路。P53信号通路在1中已作阐述, 通常构建由p53或p5 3靶基因的启动子驱动的荧光虫荧光素酶表达载体并转染到细胞系中, 在此基础进行p53信号通路相关的研究。N F-k B即核转录因子, N F-k B信号通路核心成分是Ik B激酶复合物、Ik B抑制蛋白和NF-k B二聚体。当细胞受到来自胞内外的刺激后, Ik B蛋白降解, NF-k B二聚体释放。释放后的二聚体被进一步激活后转移至细胞核与目的基因结合以促进目的基因的转录。Ja