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杨梅对亚硝酸钠和n-甲基苄胺诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核突变的抑制作用
亚硝酸盐广泛应用于各种食品中。与n-甲基胺反应合成甲基酰胺,强致突变,致癌。人们在日常生活中难以避免接触此类致癌物, 因此寻找能抑制或阻断这类物质的致突变作用的天然药物, 对于人类抗突变、防癌有重要意义。
杨梅是人们喜爱的水果之一, 其果味酸甘, 性温, 入肺胃二经, 有生津止渴、和胃消食、收敛消炎止泻之功效, 中医视之为良药。笔者研究观察了杨梅果汁对亚硝酸钠和N-甲基苄胺诱发的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核突变的抑制作用, 现报道如下。
小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验
1亚硝酸钠为北京红星化工厂生产, 分析纯。N-甲基苄胺为上海试剂三厂分析纯产品。取N-甲基苄胺1 ml, 加入5滴二甲基亚砜摇匀助溶, 加入蒸馏水100 ml, 混匀后加入亚硝酸钠0.5 g, 摇匀, 冰箱保存备用。
2杨梅为杨梅科植物杨梅 (Myrica rubra S. et. z) 的果实。于6月底选产自福建闽清的晚熟新鲜上市杨梅, 用蒸馏水洗净晾干, 于匀浆机中搅拌10 min, 用4层纱布过滤残渣, 取新鲜果汁于冰箱保存备用。
3实验小鼠由福建中医学院动物房提供, 符合清洁级的昆明种小鼠50只, 体重20~22 g, 雌雄各半, 随机分为5组。设阴性对照组, 亚硝胺阳性对照组和3个杨梅剂量组。阳性对照组每天给予亚硝酸钠和N-甲基苄胺混合液0.5 ml经口灌胃;阴性对照组以0.5 ml蒸馏水作对照;杨梅剂量组在给予亚硝酸钠和N-甲基苄胺混合液0.5 ml之后1 h, 再分别灌以蒸馏水稀释的100%、50%、25%杨梅果汁0.5 ml。试验持续7 d。最后1次给药后6 h, 小鼠断颈处死, 取一侧股骨, 用小牛血清冲洗骨髓, 混匀后直接推成血片, 每只小鼠制片2张。自然干燥后, 甲醇固定, 1∶10 Giemsa pH 6.8磷酸缓冲液染色。双盲法计数, 每只小鼠计数1000个骨髓嗜多染红细胞的微核数, 结果以千分率表示。采用双侧t检验进行2样本均数比较。
抗mn突变作用
本次实验阴性对照组的微核千分率 (MN‰) 为1.7±0.67, 与国内外有关报道的结果一致。实验结果见表1。
在连续给予小鼠服用1 W的亚硝酸钠和N-甲基苄胺混和液后MN‰升高至20.6±1.07, 而3个杨梅果汁剂量组均对亚硝酸钠和N-甲基苄胺混合液的诱发MN升高作用有很好的拮抗阻断作用 (P0.001) 。
杨梅含有丰富的VitC、葡萄糖、果糖、柠檬酸、苹果酸、草酸、乳酸, 又含有花色素的单葡萄甙和少量的双葡萄甙以及矿物质。杨梅果汁的抗MN突变作用可能是多种成分共同作用的结果, 其作用机理有待进一步研究。
自70年代初将MN试验用于致突变的研究后, 已受到国内外的重视, 为许多国家药政部门所接受。我国药政部门规定新药投产要经过MN试验以测定其致变性。并且MN试验对致癌性药物有非常高的预测率。根据MN与肿瘤的相关性, 杨梅果汁的抗MN突变作用的研究提示, 杨梅具有潜在的抗肿瘤作用, 值得进一步研究。人类进入20世纪以来, 严重的工业污染使人类接触的致突变物质越来越多。现代医学研究也不断地发现一些绿色食品具有防突变抗癌的作用, 这与传统中医推崇返朴归真, 提倡食疗、药膳有着某种默契。杨梅抗MN突变作用的发现, 对人们利用天然药品、食物防突变、抗肿瘤、开发中药资源, 无疑有着十分重要的意义。
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