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第 6 章;基本工程及其应用;;;细菌;3．基因工程的操作步骤;二、基因工程的应用及安全性 1．基因工程的应用 (1)基因工程与作物育种： ①目的：获得高产、稳产和具有优良品质的农作物，培育出具有各种 抗逆性 的作物新品种。 ②实例： 抗棉铃虫 的转基因抗虫棉。 ③意义：抗虫基因作物的使用，不仅减少了农药的用量 、大大降低了生产成本，而且还减少了农药对环境的污染。;基因工程与药物研制： ①实例：用基因工程方法生产胰岛素。 ②过程：胰岛素基因与大肠杆菌的DNA分子 重组，并且在大肠杆菌内获得成功地表达 。 基因工程与环境保护： 实例：利用转基因细菌降解 有毒有害的化合物，吸收环境中的重金属，分解泄漏的石油、处理工业废水等。;;一、基因工程的原理 1．阅读教材P102～103内容，仔细观察分析图6－6，探究下列问题。 (1)基因工程中工具酶的作用： ①DNA解旋酶和限制酶都作用于DNA，试分析这两种酶的作用部位相同吗？ 提示：不相同。DNA解旋酶作用于碱基之间的氢键，而限制酶作用于磷酸与脱氧核糖之间的化学键，即磷酸二酯键。;②切割运载体和目的基因用同一种限制酶的原因。 提示：因为只有用同一种限制酶才能切割出相同的黏性末端，利于目的基因与运载体结合。 ③限制酶和DNA连接酶作用的位点相同吗？提示：相同，均作用于磷酸二酯键。 ④若用DNA连接酶将目的基因与运载体两两结合时，可能有哪些产物？ 提示：产物可能有三种：目的基因与目的基因结合、运载体与运载体结合、目的基因与运载体结合。;(2)运载体的特点及其作用： ①运载体与物质跨膜运输中的载体化学本质相同吗？ 提示：不相同。运载体是小的DNA分子，载体是蛋白质。 ②基因工程中的运载体具有怎样的特点？ 提示：a.能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以保证外源基因在宿主细胞内长期稳定存在并复制； b．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接； c．具有某些标记基因，便于检测运载体是否进入受体细胞;2．判断下列说法的正误： (1)基因工程能够实现不同物种之间基因的重新组合。 √( (2)基因工程的运载体与物质跨膜运输所需要的载体化学本?? 相同，都是蛋白质。 ( ×) (3)所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列。×(;二、基因工程的应用及其安全性 1．转基因技术已经实现了将人的胰岛素基因转入细菌体内，利用细菌生产人的胰岛素，分析讨论下列问题： (1)试从基本单位、空间结构和碱基配对方式三个方面分析运载体与目的基因结合成功的基础。;提示：①基本单位相同：不同生物的DNA分子都是由脱氧核 苷酸构成的。 ②空间结构相同：不同生物的DNA分子都是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链形成的规则的双螺旋结构。 ③碱基配对方式相同：不同生物的DNA分子中两条链之间的碱基配对方式都是A与T配对，G与C配对。;(2)目的基因能够在受体细胞中表达的基础是什么？提示：所有生物共用一套遗传密码。 2．与杂交育种、诱变育种相比，基因工程育种原理是什么？主要优点有哪点？ 提示：其原理与杂交育种相同，是基因重组。与杂交育种相比，基因工程育种的育种周期短并产生了新性状；与诱变育种相比，基因工程育种能定向改造生物的遗传性状。;1．限制酶与DNA解旋酶的比较 (1)相同点：作用机理都是破坏化学键。 (2)不同点： ①作用部位：限制酶作用于磷酸二酯键，DNA解旋酶作用于氢键。 ②作用范围：限制酶作用于特定的核苷酸序列和特定的切点，DNA解旋酶作用于所有的DNA分子。;2．基因工程操作中的两个注意点 切割目的基因和运载体时，一般用同一种限制酶，使目的基因和运载体产生相同的黏性末端，达到目的基因与运载体结合的目的。 目的基因导入受体细胞并非标志着基因工程的成功，只有目的基因在受体细胞中表达才说明基因工程的 成功。;[例1] 某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将基因a与运载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中;获取基因a的限制酶其作用部位是图中的① 连接基因a与运载体的DNA连接酶其作用部位是图中的② 基因a进入马铃薯细胞后，可随马铃薯DNA分子的复制而复制，传给子代细胞 通过该技术人类实现了定向改造马铃薯的遗传性状;[解析] 限制酶和DNA连接酶均作用于磷酸二酯键， 即①处，二者作用相反，分别是打开和连接该化学键；目的基因进入受体细胞后，会随着马铃薯DNA分子的复制而复 制，传给子代细胞，使之产生定向变异，从而改变其遗传 性状。 [答案] B;限制酶、DNA连接酶和DNA聚合酶的区别;[例2] 右图为某种质粒表达载体 简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRI、;(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoR;(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞 进行转