液相色谱教程(四)液相色谱柱基础知识.pptVIP

Waters中国培训中心;液相色谱柱根底知识

(3);液相色谱柱与别离机理的关系;对HPLC色谱柱的要求(1);硅胶基质C18填料都相同吗？;色谱柱品牌名称;Minutes;品牌不同的影响:(相同配体);0;未湿润的孔;分;停流速后(孔去湿:~3%);带有极性基团的反相色谱填料;内嵌极性基团配体:可能机理;水外表层机理;SymmetryShield?RP18

TfUSP=1.1;注:使用相同的流动相;色谱柱选择性比较表;对HPLC色谱柱的要求(2);USP拖尾因子〔TailingFactor〕:

Tf＝

不对称因子(AssymmetryFactor):

As＝;对称峰形的益处;99.6%;由于拖尾引起的灵敏度差异;峰形对别离度的影响;不同填料的峰形比较;具有良好峰形的Symmetry柱;对HPLC色谱柱的要求(3);色谱柱重现性的重要性;同一批次合成的填料—色谱柱之间的重现性

柱床填充质量控制

塔板数

色谱峰对称性

反压

无选择性差异

不同批次合成的填料—色谱柱批次间重现性

颗粒的物理性质

外表之化学性质;Symmetry—优异的重现性;不同批次间重现性;紫杉醇中的不纯物分析:三批色谱柱所得色谱重叠图;Symmetry?色谱柱优点;对HPLC色谱柱的要求(4);pH对填料稳定性的影响;XTerra色谱填料;0;灵敏度与选择性的改变;简化方法开发过程;温度;Xterra:高温寿命试验;Xterra色谱柱的优点;最新研制的Atlantis反相柱;新型AtlantisTM填料的性质;新型AtlantisTM填料的特点;同时别离极性与非极性化合物;儿茶酚胺及其代谢产物;水溶性维生素(Vitamins);反相色谱柱的选择小结:(1);需要使用宽pH值或高温条件－如生物碱别离

XTerra杂化颗粒技术：pH1-12

优点：pH范围宽，高温条件下填料稳定性好，色谱峰

形好，寿命长

采用质谱检测器:窄内径/小颗粒/短柱

XterraMSC18

Atlantis

SymmetryC18;需要提高极性物质的保存

常规pH：AtlantisdC18

极端pH：Xterra：如碱性化合物

需要分析分子量较大的多肽或蛋白

Symmetry300

C18

C4;