H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白相互作用蛋白的筛选与鉴定的开题报告.docxVIP

H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白相互作用蛋白的筛选与鉴定的开题报告

一、选题意义

禽流感病毒是一种引起家禽严重疾病的病毒。其中，H5N1亚型禽流感病毒具有较高的致病性和传染性，能够通过空气传播也能够对人类产生感染。因此，研究H5N1亚型禽流感病毒的基本生物学特性和致病机制，对于防控禽流感病毒的传播具有重要的意义。其中，NS1蛋白作为禽流感病毒感染细胞和调控细胞免疫应答的重要蛋白，成为了研究的重要对象。

在禽流感病毒感染过程中，NS1蛋白能够与宿主细胞中的多种蛋白相互作用，从而调控宿主细胞的免疫应答。因此，研究NS1蛋白与宿主细胞中的相互作用蛋白，对于揭示禽流感病毒的致病机理和免疫逃逸机制具有重要的意义。而利用高通量蛋白质互作筛选技术，可以高效地鉴定NS1蛋白与宿主细胞中相互作用的蛋白，从而揭示NS1蛋白的作用机制和信号通路，为防控禽流感病毒的传播提供理论基础和技术支持。

二、研究内容

本研究旨在利用高通量蛋白质互作筛选技术，筛选出NS1蛋白与宿主细胞中相互作用的蛋白，并通过蛋白质组学和蛋白结构预测等手段对筛选出的蛋白进行鉴定和分析，从而探寻NS1蛋白的作用机制和信号通路。具体内容如下：

1.构建NS1蛋白表达系统

通过DNA重组技术构建NS1蛋白表达系统，包括NS1蛋白表达载体的构建和稳定的细胞株的建立。优化NS1蛋白表达和提取条件，制备高纯度的NS1蛋白，作为高通量蛋白质互作筛选的材料。

2.建立高通量蛋白质互作筛选平台

建立高通量蛋白质互作筛选平台，包括蛋白质表达、纯化、鉴定和互作筛选等环节。利用人类肝癌细胞株Huh7的全基因组cDNA文库，筛选NS1蛋白与宿主细胞中相互作用的蛋白，并通过蛋白质组学技术对筛选出的蛋白进行鉴定和分析。

3.对筛选出的蛋白进行功能和通路分析

利用生物信息学和蛋白结构预测等手段，对筛选出的蛋白进行功能和通路分析，揭示NS1蛋白作用的信号通路和生物学意义。

三、研究意义与预期结果

本研究将通过筛选NS1蛋白与宿主细胞中相互作用的蛋白，并通过蛋白质组学和蛋白结构预测等手段对筛选出的蛋白进行鉴定和分析，探寻NS1蛋白的作用机制和信号通路。通过本研究，预计可以揭示NS1蛋白作用的分子机制和生物学意义，为防控禽流感病毒的传播提供理论基础和技术支持。