蛋白质和氨基酸鉴别反应总结.docxVIP

双缩脲反应

现象：凡分子中含有两个以上一CO—NH一键的化合物都能在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色络合物，成为双缩脲反应。

应用对象：蛋白质，多肽

试剂：双缩脲试剂

5gNaOH溶于50mL水中；硫酸铜溶于50mL水中

方法：取1mL样品于试管中，先加入2mLNaOH溶液，振荡摇匀，造成碱性环境，再加入

3-4滴CuSO4，观察现象。

鉴别：反应呈粉红色或紫红色表明有结合态的蛋白质。

米伦反应

现象：米伦试剂能与单酚、双酚和吲哚生物产生颜色，这些反应最初产生的有色物质可能是酚的亚硝基衍生物，经互变异构后成为颜色更深的邻醍肟，最终形成红色稳定产物。

应用对象：酪氨酸酚羟基，酚类蛋白

试剂：米伦试剂

60mL浓硝酸（比重1.42）中溶解汞

方法：取样品1mL于试管中，加入米伦试剂0.5mL混合，加热，观察其颜色变化。

鉴别：若有酚类蛋白质，则加入米伦试剂后产生白色蛋白质沉淀，加热后变成红色。（该

反应不能用来测定尿中的蛋白质，试剂中的汞离子能被尿、无机盐所沉淀，使试剂失效）

乙醛酸反应

现象：含有吲哚基的色氨酸在浓硫酸存在下与乙醛酸（CHOCOOH）缩合，形成与靛蓝相似的物质。此反应机理尚不清楚，可能是由一分子乙醛酸与两分子色氨酸脱水缩合而成的。含有色氨酸的蛋白质也有此反应。血清球蛋白含色氨酸残基的量较为稳定，故临床生化检验可用乙醛酸反应来定性测定球蛋白量。

应用对象：|色