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兔眼房水外引种机理的研究进展

异常的血流动力学变化会导致视觉轴向运动的阻塞、视网膜神经节细胞的死亡以及视觉萎缩和功能丧失。目前对青光眼的治疗无论药物还是手术治疗,主要以降低眼压为主。高眼压既是青光眼发病的关键因素和治疗的主要靶点,又是制作高眼压模型的出发点和评价标准。对青光眼病因、病理、预防、诊断和治疗的研究都需要合适的青光眼动物模型。现有研究发现:在兔、狗、猫、猴、鼠等动物均发现原发性青光眼,或称为自发性、遗传性青光眼。但由于动物原发性青光眼的来源有限,不能满足对青光眼研究的广泛需要,人们早在1870年就开始试用各种不同的方法来诱导产生青光眼。

目前用于制作青光眼模型的动物为低等哺乳动物,主要有兔、鼠和猴。由于鼠容易用转基因技术改造和繁殖,容易掌握和花费少,且鼠眼的构造在很多方面和人眼类似,如小梁、Schlemm管、睫状体、视网膜血管等,故近年来青光眼鼠模型应用的报道越来越多,是值得注意的研究动向。激光诱导的猴高眼压模型是目前公认的最理想的高眼压动物模型,但因造价昂贵,操作较复杂,国内应用不多。现应用最多的动物模型是兔。兔眼与人眼的房角结构有形态学差异,但房水外流通道相同,都有连续的内皮细胞内衬。家兔价廉、温顺、易于获得和操作,因此兔是最常用于制作青光眼模型的实验动物。实验性兔青光眼模型主要在兔眼内注射某种物质,阻塞房角使小梁网变性,从而升高眼压。曾报道过的注射物质有α-糜蛋白酶、甲基纤维素、血影细胞、玻璃酸钠、复方卡波姆溶液等。前几种模型高眼压不稳定、持久,有较明显的并发症。2002年徐岩等首次报道了复方卡波姆溶液诱发的兔高眼压模型与其他兔高眼压模型比较的研究,肯定了该模型的实用性。此后,应用这种高眼压模型进行青光眼研究的报道日益增多。本文主要就此模型的制作、高眼压水平及模型评价的研究现状综述如下。

1基于模型理论的基础

1.1慢性高眼压模型主要由房水-小梁网途径而设

正常情况下,房水经由小梁网、Schlemm管、集合管,进入上巩膜静脉窦(常规途径)或由葡萄膜巩膜途径(非常规途径)流出眼外,而常规途径的房水引流量占房水流出总量的85%~95%。故慢性高眼压模型多是针对房水-小梁网途径而设。制作动物的高眼压模型需人工改变房水的循环过程,该模型即是从前房阻断房水外流。

1.2聚戊醇酯类聚合物

徐岩等应用的复方卡波姆溶液为3g·L-1卡波姆和0.25g·L-1地塞米松的混合溶液,pH值为4.0。卡波姆是丙烯酸与烯丙基蔗糖或季戊四醇交链而成的高分子聚合物,是一种优良的药剂新辅料。有良好的乳化性、增稠性、助悬性和成膜性。当pH值较低时呈溶液状,随着pH值的升高,药液的黏稠度逐渐增加而形成水凝胶状,且当pH值为6~12时最为黏稠;在高眼压模型中主要应用的是该药的黏合性、凝胶性、增稠性等特点,使注入前房的卡波姆溶液在房水作用下随着pH值的升高变为凝胶状阻碍房水排出。地塞米松即可减轻前房的炎症反应,又能维持较长时间的高眼压。

2身麻醉联合局部麻醉

复方卡波姆诱导的兔慢性高眼压模型的研究中麻醉方式为全身麻醉联合表面麻醉剂局部麻醉或单纯表面麻醉剂麻醉2种。全身麻醉药物多为速眠新或戊巴比妥钠。实验操作中若为单纯研究高眼压模型可采用全身麻醉联合局部麻醉的方法。但如果造模后还有多次需要全身麻醉的其他检查,则最好采取局部麻醉,因多次全身麻醉易导致兔死亡。兔因疼痛或其他不适而挣扎时往往给操作带来困难,容易刺伤角膜、虹膜、晶状体等,如何有效的固定动物、减少操作的困难,应根据实验内容来决定。

3perkin眼压计测量

复方卡波姆诱导的兔慢性高眼压模型的相关研究中,测量兔眼压的眼压计主要有2种:压平式眼压计与压陷式眼压计,前者包括Tonopen笔式眼压计、Perkins手持眼压计,后者为Schi?tz修氏眼压计。不同的眼压计各有其优缺点。Perkins眼压计为手持式压平眼压计,原理同Goldmann眼压计,也是根据Imbert-Fick定律设计的。检查时不需裂隙灯显微镜,也不受体位限制,测量0~50mmHg(1kPa=7.5mmHg)的压力最准确。国外Coban等兔在体研究发现Perkins眼压计测量的眼压在10~20mmHg。Perkins眼压计的重复性相当好,30~45mmHg时较好,50mmHg时差。Tonopen眼压计是一种含微电脑分析系统的手持式电子眼压计,它体积小,操作简单,不需裂隙灯和荧光素,且准确可靠,可用于有角膜溃疡、角膜瘢痕、严重散光的患眼的眼压测量,弥补了其他眼压计的不足。国外研究者在兔、大鼠和小鼠实验时得出相同的结论:Tonopen眼压计测量的眼压值一直偏低,5~25mmHg(15mmHg除外)与真实值相近,以后随着眼压的增高,测量误差增大,最大可达到6mmHg。压陷式眼压计的原理为当一定大小的力压于