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茯苓的作用机制

椰子茯苓是一种具有优良疗效的药物菌。它属于担子菌、多孔菌和多孔菌科。具有润湿利尿、健脾健胃、益体强心、安神安神的功效。茯苓不但可以入药,也是我国传统的保健食品,1989年卫生部确认它既可作药物又可作食品。茯苓主要成分为β-茯苓聚糖[(β-Pachyman)(C6H10O5)n],约占干燥茯苓的93%,其他尚含有乙酰茯苓酸、茯苓酸等三萜系化含物,此外还含有微量β-茯苓聚糖分解酶及蛋白质分解酶。

G.Chihara等研究证明,茯苓聚糖的主要结构是带有少量β(1-6)支链的(1-3)-β-D-葡聚糖,对S-180肉瘤无抑制率。鉴于具有线型(1-3)-β-D-葡聚糖结构的蘑菇多糖具有很强的抗肿瘤活性,G.Chihara等尝试采用选择性氧化方法将β-茯苓多糖中β(1-6)支链切断,并经适度水解,果然得到了对ICR/JCL小鼠S180肉瘤具有很强抑制作用、结构类似于菇类多糖的β-茯苓多糖(β-pachymaran),可望作为优良的细胞药物响应的免疫促进剂。然而,β-茯苓多糖大多不溶解于水,难以用同位素标记进行生物研究。因此,JHamuro等将β-茯苓多糖进行羧甲基化,得到了易溶于水的β-茯苓多糖衍生物-羧甲基茯苓多糖[Carboxymethy1-pachymaran,CMP],且同样具有显著的抗肿瘤活性。自上述开创性的工作以来,掀起了对茯苓多糖提取及羧甲基化研究的热潮。

1多糖提取方法

与其他真菌多糖一样,茯苓多糖的分离提取方法也是利用了多糖溶于水或酸、碱、盐溶液而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂的特点,目前主要采取热水浸提法和碱液浸提法。

1.1超声辅助提取法

茯苓多糖主要分水溶性茯苓多糖和碱溶性茯苓多糖。水溶性茯苓多糖是杂多糖,单糖组分除D-葡萄糖外,还有D-半乳糖、D-甘露糖、D-岩藻糖和痕量的D-木糖及糖醛酸。水溶性茯苓多糖的含量虽然较低,但能减轻癌症患者放、化疗的毒副作用;对肝硬化、慢性迁延性肝炎有较好的疗效;临床证明是一种具有“扶正固体”、无任何毒副作用的抗肿瘤药物。常规热水浸提法的主要工艺路线如下:原料→水煎煮→抽滤→滤液脱色→浓缩→乙醇沉淀→有机溶剂洗涤→粗多糖。周燕霞等以茯苓为原料,采用该法提取水溶性茯苓多糖,通过正交试验确立了提取的最佳工艺条件,结果提取率最高只有0.83%。实验还表明,增加压力能促进多糖的提取。鉴于热水浸提法时间长且多糖的提取率低的缺点,有人将超声波技术应用于其中,结果提取率提高到1.6%。超声提取技术的基本原理主要是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合。超声提取技术与常规提取法相比,具有提取时间短、产率高、无需加热等优点。黄才欢等在比较了水溶性多糖的各种提取方法之后,应用生化技术,引入酶解的方法,简化了茯苓多糖的提取工艺,使水溶性多糖的提取率得到了明显的提高,茯苓经过预处理+浸泡+酶解+水煮的方法,使水溶性多糖的提取率达到了2.4%。李莉等利用植物精提复合酶(主要成分为纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶等)+热水浸提法提取茯苓多糖,浸提时间缩短近50%,提取率是热水浸提法的2.32倍。该法全过程为酶解反应和80℃热水浸提二个阶段。第一阶段主要作用是酶解细胞表面结构及胞间连接物,并伴有部分糖类物质溶出。第二阶段通过提高温度后,既具有灭酶作用,同时使溶于热水的胞内溶出物增加。研究发现二个阶段都很重要。之后,聂金嫒等进一步将微波辅助提取新技术应用于茯苓水溶性多糖的提取中,采用均匀设计和正交设计优化实验条件,找到最佳提取条件为时间18min、微波占空比42%、固液比1∶50,此时提取率达2.79%。与传统回流提取率相比,时间大大缩短,提取率也远远超过传统法;与超声提取相比,只用不到50%的时间,提取率提高了63.5%;另外,与酶法相比,提取率也相当,但提取时间明显缩短,既节能又高效。

1.2次合并的提取工艺

茯苓中茯苓多糖大多是碱溶性多糖,单糖组分主要是葡萄糖。因此用碱液来提取茯苓多糖的研究相对较多,也较为重要。碱浸法提取多糖一般是采用在低温下用碱液浸泡,抽滤,用醋酸中和滤液,低温放置过夜,抽滤,然后用有机溶剂洗涤,低温干燥得多糖。周燕霞等用0.5mol/LNaOH溶液,在料液比1∶100的条件下提取7h,结果二次合并的提取率为74.9%。黄才欢等利用1.0mol/L的碱溶液在4℃提取二次,结果提取率达到78.5%。研究表明,提取的温度、碱浓度、酶活力均对提取产生一定的影响,其中最为明显的是碱液浓度,