高中生物人教版课件：动物细胞培养第一课时.pptx

第2章第二节动物细胞工程

—动物细胞培养

年级：高二年级学科：生物学

主讲人：胡慧学校：临澧县第一中学

在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤？能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？

通过细胞培养构建的人造皮肤

可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增；对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。

最基础的是

——动物细胞培养技术

动物细胞工程常用的技术：

动物细胞培养

动物细胞融合

动物细胞核移植等

一、动物细胞培养的概念

从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

原理：

细胞增殖（有丝分裂）

二、动物细胞培养的条件

1.营养

（1）培养基构成：

合成培养基：

血清等一些天然成分：

（2）培养基类型：

液体培养基

（培养液）

将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按种类和所需量严格配制的培养基。

含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质

2.无菌、无毒的环境

①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。

②在无菌环境下进行操作。

③培养液需要定期更换：

清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

二、动物细胞培养的条件

3.温度、pH和渗透压

（1）适宜的温度：

（2）适宜的pH：

多数动物细胞生存的适宜pH为________

7.2-7.4

（3）适宜的渗透压：

目的________________________。

维持细胞正常的形态和功能

二、动物细胞培养的条件

哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；

36.5±0.5℃

4.气体环境

（2）气体组成及作用：

O2：

CO2：

细胞代谢所必需

维持培养液的pH

（1）具体操作：

通常采用培养皿或松盖培养瓶。

置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。

二、动物细胞培养的条件

营养条件

其他条件

无菌、无毒的环境

适宜的温度、pH和渗透压

适宜的气体环境

糖类、氨基酸、无机盐、维生素等

动物细胞培养的条件

二、动物细胞培养的条件

三、动物细胞培养的过程

取动物组织

制成细胞悬液

转入培养液进行原代培养

分瓶

进行传代培养

细胞贴壁

接触抑制

重要名词解释

①原代培养：

通常将________的细胞培养，即动物组织经_____后的________称为原代培养；

分瓶之前

处理

初次培养

②传代培养：

将______的细胞培养称为传代培养；

分瓶后

③细胞贴壁：

______体外培养的细胞需要___________________才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的____上，这种现象称为细胞贴壁；

大多数

贴附于某些基质表面

瓶壁

④接触抑制：

当_____细胞生长到_____________时，细胞通常会_____________；

贴壁

表面相互接触

停止分裂增殖

1.取动物组织

（1）取材:

一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。

（2）取材原因:

细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养

三、动物细胞培养的过程

2.制成细胞悬液

（1）将组织分散成单个细胞

②方法:

机械法

用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理

①原因:

Ⅰ.从动物体取出的成块组织，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖；

Ⅱ.分散后使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。

（2）用培养液将细胞制成细胞悬液。

三、动物细胞培养的过程

3.原代培养

（1）操作方法：

将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中培养。

（2）体外培养的动物细胞类型

①悬浮生长类：

能够悬浮在培养液中生长增殖。

②贴壁生长类：

贴附于某些基质表面才能生长增殖

三、动物细胞培养的过程

4.分瓶、进行传代培养

（1）需分瓶进行传代培养的原因：

细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素会使细胞分裂受阻

（2）方法：

①收集细胞

②将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养

三、动物细胞培养的过程

动物胚胎或幼龄动物的组织、器官

单个细胞

细胞悬浮液

10代

细胞

少部分突破细胞寿限“癌变”，无限传代

50代细胞

原代培养

传代培养

细胞贴壁

剥离、