实验二免疫球蛋白的提取.pptVIP

关于实验二免疫球蛋白的提取第1页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三概述从血清中（或体液中）分离免疫球蛋白就是根据各类免疫球蛋白与其他血清蛋白的分子大小、电离密度、等电点及在水溶液中溶解度不同的特性，将他们分离出来，进而加以纯化。免疫球蛋白的分离与纯化是免疫学实验技术的基础。免疫球蛋白分离与纯化的方法很多，常用的有盐析法、凝胶过滤法、离子交换层析法及亲和层析法等。第2页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三凝胶过滤法凝胶过滤主要是利用具有分子筛效应的多孔网状凝胶作介质，按照各物质分子量的不同、分子形状和水化作用的不同，在层析柱上进行分离。一些小分子物质可以进入凝胶粒子内部，洗脱时速度较慢，大分子物质被阻于凝胶粒子外，洗脱较快。常用的凝胶有交联葡聚糖凝胶、交联聚丙酰胺和琼脂糖凝胶等。第3页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三第4页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三离子交换层析法离子交换层析是利用蛋白质带电部分与具有相反电荷的离子交换剂的吸附和解吸附原理进行的。常用的离子交换剂有DEAE纤维素（?球蛋白）和QAE-交联葡聚糖A-50（IgG），二者都是碱性阴离子交换剂，当溶液PH高于蛋白质等电点时，其阳离子基团可与蛋白质的阴离子基团交换吸附。当溶液PH接近蛋白质等电点时，蛋白质静电荷变为零，不能吸附，被洗脱下柱。第5页，讲稿共1