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突变亨廷顿蛋白表达对CRE介导的基因转录的影响的开题报告

题目：

突变亨廷顿蛋白表达对CRE介导的基因转录的影响

研究背景：

亨廷顿病是一种遗传性的神经变性疾病，其主要病理特征是大脑皮层和纹状体的萎缩，导致运动障碍、认知障碍和精神障碍等严重表现。亨廷顿疾病是由HTT基因（编码亨廷顿蛋白）的CAG三核苷酸重复拓展引起的，并且CAG连续重复的长度与疾病的严重程度成正比。

CREB（细胞内第二信使的重要调节因子）已经被证明在突触可塑性和长期记忆中发挥关键作用。研究已经表明：在神经元中，亨廷顿蛋白的异常突变会对CREB介导的基因转录产生影响，从而影响神经元的生存和功能。但是，对于亨廷顿蛋白突变如何影响CREB的功能以及与之关联的基因转录的具体机制很少有研究。

研究目的：

本研究旨在探究突变亨廷顿蛋白表达对CRE介导的基因转录的影响，进一步阐明亨廷顿蛋白突变与亨廷顿病之间的关系，并为亨廷顿病的治疗提供新的理论基础和治疗策略。

研究内容和方法：

1.构建突变HTT基因的细胞模型

使用CRISPR/Cas9技术构建突变HTT基因的细胞模型，通过引入不同长度的CAG三核苷酸序列，考察不同长度的CAG序列的重复对亨廷顿蛋白的表达和细胞功能的影响。

2.分析亨廷顿蛋白突变对CREB功能的影响

利用Westernblot、免疫荧光染色等方法检测突变HTT基因在细胞中的表达，并测定亨廷顿蛋白突变对CREB蛋白表达和功能的影响。

3.研究亨廷顿蛋白突变对与CREB相关的基因表达的影响

使用RNA-Seq技术和拟南芥转录组分析数据库，对CREB介导的基因转录在突变HTT基因的细胞模型中的差异表达情况进行比较分析，进一步评估亨廷顿蛋白突变对与CREB相关基因表达的影响。

研究预期结果：

本研究将揭示突变HTT基因表达对CRE介导的基因转录的影响机制，进一步阐明亨廷顿蛋白突变和亨廷顿疾病之间的关系，并为深入理解亨廷顿疾病的发病机制和设计治疗策略提供理论基础。