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- 2024-01-03 发布于内蒙古
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PCR小专题梳理
利用PCR获取和扩增目的基因①原理:DNA复制(DNA半保留复制)。②条件:DNA模板、2种引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸。③扩增过程过程说明图解高温变性温度超过90℃,双链DNA解聚为单链低温复性温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合中温延伸温度上升到72℃左右,溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链模板、原料、能量、酶、1对引物PCR
易错提醒(1)在PCR过程中实际加入的为dNTP(即dATP、dGTP、dTTP、dCTP),既可作为合成的原料,又可为DNA的合成提供。(2)引物既可以是DNA单链,也可以为。细胞内的DNA进行复制时,也需要,一般为RNA片段。(3)真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要激活。因此,PCR反应缓冲溶液中一般要添加。DNA子链能量RNA单链引物Mg2+Mg2+PCR技术和DNA复制的比较
关于引物一、引物是什么?引物是一小段单链的核酸,作为新子链的合成起点,只能结合在母链的3’端;可以是DNA也可以是RNA(依据目的基因两端序列,设计出的2种特异性的引物)二、为什么要设计(加入)引物?DNA聚合酶不能从头合成DNA,只能从引物的3′端开始延伸DNA链。三、引物的作用?使DNA聚合酶能够从引物的3
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