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DNA基礎
;一、DNA結構與特徵
1.DNA分子結構
線性大分子-基本單位為去氧核苷酸
組成----堿基、去氧核糖、磷酸
差別----堿基:嘌呤堿—腺嘌呤(A)與鳥嘌呤(G)
嘧啶堿—胞嘧啶(C)與胸腺嘧啶(T)
結構:堿基+去氧核糖=去氧核苷-+磷酸=去氧核苷酸
;2.DNA理化性質
1)?DNA的變性
變性(denaturation):在一定條件下,DNA雙鏈間氫鍵斷
裂,形成單鏈結構的過程。也稱退火(annealing)。
条件:A:溫度上升----Tm值(meltingtemperature)
50%DNA分子解鏈的溫度。
與GC/TA比值有關。1%GC-0.4℃。
B:鹼性升高---0.5NNaOH-完全解链。
2)DNA的複性
複性(renaturation)撤除變性條件後,變性的單鏈DNA根據堿基互補的原則,恢復成DNA雙鏈的過程。
條件:A:溫度降低—過低易錯配。過高不易複性。
B:高離子強度。
3)DNA分子雜交
雜交(hybridization):來源不同的兩條DNA單鏈根據堿基互補的原則,形成雙鏈雜種DNA的過程。
;二、基因
1.基因與基因組
基因(gene):合成有功能的蛋白質多肽鏈
或RNA所需的全部核苷酸序列
基因組(genome):一個生物體的所有基因。
核基因組:細胞核中23對染色體包含的所有基因
線粒體基因組:線粒體DNA中的所有基因
2.?基因結構
結構基因:能夠編碼產生蛋白質產物的基因。
外顯子(exon):編碼序列。
內含子(intron):非編碼序列(間隔列)。
如β珠蛋白-1700堿基(bp),編碼146個氨
基酸,3個外顯子,2個內含子。
;3.基因突變
突變(mutation):DNA分子中的核苷酸序列的改變。
1)點突變(pointmutation):單堿基置換。
同義突變(samesensemutation):簡並密碼,無突變效應。
錯義突變(missensemutation):新密碼子,氨基酸序列變化,產生突變效應。
無義突變(non-sensemutation):變成終止密碼,合成不完整多肽產生突變效應。
終止密碼突變(terminatorcodonmutation):合成過長的多肽???產生突變效應。
移碼突變(frame-shiftmutation):DNA鏈中插入1個或幾個單堿對,使突變處以下部位密碼發生變化,使合成的氨基酸種類或序列變化,產生突變效應。
2)片段突變:DNA鏈中小片段單堿序列發生缺失、重複或
重排,產生突變效應。;單堿基突變(圖中用黑點示意位置為突變點);三、DNA多態性的分類
1)長度多態性:等位基因片段長度的個體差
別。由一特定序列,首尾相連串聯
重複次數不同產生的個體差別。
可變數目串聯重複(variablenumberof
tandemrepeat,VNTR)
短串聯重複(shorttandemrepeat,STR)
A:產生原因:DNA滑動與同源染色體
不等交換。
;B:差別:VNTRSTR
重複序列組成2-7bp7-數十bp
重複序列數目2-10數個10數個-數百個
鑒別能力高極高
優勢擴增現象不明顯極明顯
檢測靈敏度極高稍差
片段總長度
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