法医物证学课件.pptxVIP

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DNA基礎

;一、DNA結構與特徵

1.DNA分子結構

線性大分子-基本單位為去氧核苷酸

組成----堿基、去氧核糖、磷酸

差別----堿基:嘌呤堿—腺嘌呤(A)與鳥嘌呤(G)

嘧啶堿—胞嘧啶(C)與胸腺嘧啶(T)

結構:堿基+去氧核糖=去氧核苷-+磷酸=去氧核苷酸

;2.DNA理化性質

1)?DNA的變性

變性(denaturation):在一定條件下,DNA雙鏈間氫鍵斷

裂,形成單鏈結構的過程。也稱退火(annealing)。

条件:A:溫度上升----Tm值(meltingtemperature)

50%DNA分子解鏈的溫度。

與GC/TA比值有關。1%GC-0.4℃。

B:鹼性升高---0.5NNaOH-完全解链。

2)DNA的複性

複性(renaturation)撤除變性條件後,變性的單鏈DNA根據堿基互補的原則,恢復成DNA雙鏈的過程。

條件:A:溫度降低—過低易錯配。過高不易複性。

B:高離子強度。

3)DNA分子雜交

雜交(hybridization):來源不同的兩條DNA單鏈根據堿基互補的原則,形成雙鏈雜種DNA的過程。

;二、基因

1.基因與基因組

基因(gene):合成有功能的蛋白質多肽鏈

或RNA所需的全部核苷酸序列

基因組(genome):一個生物體的所有基因。

核基因組:細胞核中23對染色體包含的所有基因

線粒體基因組:線粒體DNA中的所有基因

2.?基因結構

結構基因:能夠編碼產生蛋白質產物的基因。

外顯子(exon):編碼序列。

內含子(intron):非編碼序列(間隔列)。

如β珠蛋白-1700堿基(bp),編碼146個氨

基酸,3個外顯子,2個內含子。

;3.基因突變

突變(mutation):DNA分子中的核苷酸序列的改變。

1)點突變(pointmutation):單堿基置換。

同義突變(samesensemutation):簡並密碼,無突變效應。

錯義突變(missensemutation):新密碼子,氨基酸序列變化,產生突變效應。

無義突變(non-sensemutation):變成終止密碼,合成不完整多肽產生突變效應。

終止密碼突變(terminatorcodonmutation):合成過長的多肽???產生突變效應。

移碼突變(frame-shiftmutation):DNA鏈中插入1個或幾個單堿對,使突變處以下部位密碼發生變化,使合成的氨基酸種類或序列變化,產生突變效應。

2)片段突變:DNA鏈中小片段單堿序列發生缺失、重複或

重排,產生突變效應。;單堿基突變(圖中用黑點示意位置為突變點);三、DNA多態性的分類

1)長度多態性:等位基因片段長度的個體差

別。由一特定序列,首尾相連串聯

重複次數不同產生的個體差別。

可變數目串聯重複(variablenumberof

tandemrepeat,VNTR)

短串聯重複(shorttandemrepeat,STR)

A:產生原因:DNA滑動與同源染色體

不等交換。

;B:差別:VNTRSTR

重複序列組成2-7bp7-數十bp

重複序列數目2-10數個10數個-數百個

鑒別能力高極高

優勢擴增現象不明顯極明顯

檢測靈敏度極高稍差

片段總長度

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