动物细胞融合与单克隆抗体技术.pptVIP

3.细胞融合技术：脾细胞(B淋巴细胞)骨髓瘤细胞杂交瘤细胞长命不分泌抗体分泌抗体短命分泌抗体长命K?hler和Milstein,19751984年Nobel医学奖第30页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三4.HAT选择性培养基的筛选融合后细胞混合液HAT培养基2weekslaterHT培养基正常培养基1weeklater第31页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三杂交瘤细胞的筛选：脾细胞(B淋巴细胞)骨髓瘤细胞杂交瘤细胞脾细胞/?脾细胞骨髓瘤细胞/?骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞脾细胞筛选出不能长期存活不能长期存活第32页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三5.阳性杂交瘤细胞的筛选（抗体的检测）常用方法：要求：简便、快速、敏感;在短时间内能检测大量样品酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)间接免疫荧光法(Indirectimmunofluorescence,IFA)放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)双相扩散法第33页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三酶联免疫吸附法(ELISA)抗原第1抗体酶第2抗体待检杂交瘤培养上清液底物有色产物酶标仪