实验八叶绿体中色素的提取和分离整理.pptVIP

3、?画滤液细线时重复画几次的目的是什么？增加色素的含量，使分离后的色素带更加清晰第23页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三4.为什么不能让滤液细线触及层析液？层析液会溶解色素使色素无法分离。第24页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素（最快）、叶黄素、叶绿素a（最多）和叶绿素b（最慢）。第25页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三二、实验原理（一）叶绿体色素：1.叶绿素2.类胡萝卜素叶绿素a叶绿素b胡萝卜素叶黄素3:1(阳生)２:1(阴生)2：13：1第26页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三绿叶中的色素类胡萝卜素（含量约1/4）叶绿素（含量约3/4）胡萝卜素（橙黄色）叶黄素（黄色）叶绿素a（蓝绿色）叶绿素b（黄绿色）第27页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三实验关键:1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片.(如菠菜叶)2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复2-3次。3.层析时不要让滤液细线触及层析液。第28页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三第1页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三二、实验原理（一）叶绿体色素：1.叶绿素2.类胡萝卜素叶绿素a叶绿素b胡萝卜素叶黄素3:1(阳生)２:1(阴生)2：13：1第2页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三叶绿素a、b的结构式第3页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三类胡萝卜素的结构式第4页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三（二）四种色素的化学性质均为亲脂性亲水性，∴均不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。极性大小：叶绿素b叶绿素a叶黄素胡萝卜素。∴根据相似相溶原理，在有机溶液中的溶解度：叶绿素b叶绿素a叶黄素胡萝卜素。第5页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三（二）叶绿素的光学性质叶绿素的吸收光谱第6页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三类胡萝卜素的吸收光谱第7页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三实验原理：①叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、无水乙醇等能提取色素。②层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析液来分离四种色素。第8页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三实验材料用具：1、材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。2、仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，研钵玻璃漏斗，尼龙布（或棉花），毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。3、药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。第9页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三实验过程：1、提取叶绿素的步骤?：（1）称：用天平称量5g除去叶柄的叶片（2）剪：越细越好，尽量去除叶脉等部分（3）加药品：加少量二氧化硅，碳酸钙和丙酮（约5mL）快速充分研磨。第10页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三（4）磨：研磨要领是要用力压快速研磨。（5）过滤：用纱布（或棉花）、漏斗和试管，最后提取液置于试管中待用，及时用棉塞（或塞子）将试管塞严.第11页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三第12页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三第13页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三第14页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三第15页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三第16页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三2、分离色素的步骤①制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤纸条一端剪去两个角作标记，在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。②画滤液细线：沿铅笔线轻轻均匀地画一道线，用提取液反复划好几次，每次划完尽量吹干，不要弄破纸条。第17页，讲稿共39页，2023年5月2日，星期三③层析分离叶绿体中的色素：将3mL层析液倒入烧杯中，注意将纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中。④观察实验结果：最后滤纸条上将分