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鲍曼不动杆菌的生物危害评估报告

一、细菌的传播和致病

鲍曼不动杆菌为不动杆菌属中最常见的一种革兰阴性杆菌，广泛存在于自然界的水及土壤、医院环境及人体皮肤、呼吸道、消化道和泌尿生殖道中，为条件致病菌。该菌在医院环境中分布很广且可以长期存活，极易造成危重患者的感染，因此常从被感染患者的血、尿、脓液及呼吸道分泌物等标本中分离出。。调查结果显示，鲍曼不动杆菌以痰液及支气管吸出物标本中检出最多，其次为脓液及分泌物。

感染源可以是病人自身(内源性感染)，亦可以是不动杆菌感染者或带菌者，尤其是双手带菌的医务人员。传播途径有接触传播和空气传播。在医院里，污染的医疗器械及工作人员的手是重要的传播媒介。易感者为老年患者、早产儿和新生儿，手术创伤、严重烧伤、气管切开或插管、使用人工呼吸机、行静脉导管和腹膜透析者，广谱抗菌药物或免疫抑制剂应用者等。在使用呼吸机者中，肺炎发生率约为3%~5%

二、细菌的生物学特性

鲍曼不动杆菌为革兰氏阴性菌球杆状无芽孢、无鞭毛单个细胞大小为（1.5μm×1.5-2.5μm）有时很难脱色,通常成对排列。在静止生长和非选择性琼脂,以球杆状形态为主,而在液体培养基中的早期培养物和在含抗细胞壁的抗生素平板上的培养物,多为杆状。菌落光滑,不透明，比肠杆菌科成员的菌落略小一些,菌落为无色或略带粉色。鲍曼不动杆菌为专性需氧菌,营养要求不高,普通培养基上生长良好,最适生长温度35℃,可在麦康凯培养基上生长。

三、细菌的实验室检查及其它检查

根据采样部位的不同细菌分离培养的方法略有不同。

①尿液标本吸取尿液5-10ml置无菌试管中3000-4000r/min离心30min，倾去上清液，取沉渣涂片革兰染色后镜检。取1ul标准环尿液在血平皿上按四区法划线.37℃培养18-24小时血平皿有菌落生长→做菌落计数(CFU/ml),分纯待进一步鉴定。

②脑脊液标本(浆膜腔穿刺液胸水、腹水、关节液、心包液等)标本.采用直接涂片革兰氏染色。标本→离心15min（1500g）→将已离心的沉淀物做→根据革兰染色的细菌形态，初步提示感染细菌的种类。接种血平皿按四区法划线放37℃培养18-24小时血平皿有菌落生长分纯待进一步鉴定。同时将标本接种营养肉汤进行增菌培养，37℃培养18-24小时后，取增菌液接种血平皿放37℃培养18-24小时如果血平皿有菌落生长分纯待进一步鉴定。

③鼻、咽部拭子拭子采用直接涂片革兰氏染色。同时拭子直接接种血平板按四区法划线。37℃培养18——24h，分纯待进一步鉴定。

④脓汁和创伤感染标本将标本直接接种血平板按四区法划线37℃培养18--24h，分纯待进一步鉴定。

⑤血液标本标本采集后立即进行传统肉汤增菌或自动血培养仪检测法增菌。若指示有细菌生长，立即用注射器无菌法抽取阳性瓶中培养物作涂片、革兰染色、显微镜检查做初步判断，同时接种血琼脂平皿，37℃需氧培养。

⑥痰标本不含或含粘液很少合格标本，可直接接种。遇有含大量粘液的标本，应加入等量液化剂sputosol一种商品化的痰液溶解剂作用20min，溶解粘痰，使痰液均质化后接种。将处理后的痰液接种于血琼脂平板、37℃培养18-24h分纯待进一步鉴定。如24h无细菌生长应再放置24h再观察菌落生长情况如仍无生长则定为阴性。

已接种的培养基需连续培养观察3d，确认无疑似鲍曼不动杆菌落出现时方可经高压灭菌后弃去。可疑菌落经分纯后，接种2个血平板，分别置于35℃和44℃培养箱中培养18--24小时，44℃生长可将鲍曼不动杆菌和（genomospeciesTU13与其他不动杆菌区别开来）。获单个纯菌落后种于生化鉴定条上进行菌种鉴定。补充触酶、动力、及分子生物学鉴定方法。

3尿液菌落计数

取1ul接种环尿液所生长的菌落数乘以1000即为每ml的菌落数CFU/ml。临床上以细菌数≥105CFU/ml做为诊断泌尿系感染的重要指标。诊断泌尿系感染的细菌学标准是菌落计数≥105cfu/ml才有诊断价值。

4生化鉴定

不动杆菌属一般特性为革兰氏阴性、需氧、无动力的双球菌或球杆菌.触酶阳性、过氧化酶阴性。生化反应的一般性状为氧化酶阴性触酶阳性无动力吲哚阴性不发酵糖类不还原硝酸盐。操作方法为挑取纯培养的细菌进行生化鉴定，补充触酶、动力试验，具体方法见生物化学鉴定部分。

动力试验用无菌操作技术，灭菌穿刺针沾取细菌后，垂直刺入半固体培养基中央直达近管底处，再沿原穿刺线抽出即可，置37℃温箱培养，次日观察结果。无动力之细菌仅沿穿刺线生长,清晰可见有动力的细菌使培养基呈现混浊样穿刺线甚至难以看出。

5、KIA鉴定结果底层及斜面均不变色。结果判定标准为产H2S中层或底部变